CYC065

CYC065 是第二代口服有效的 ATP 竞争性的 CDK2/CDK9 激酶抑制剂。

信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> CDK

研究领域 >> 癌症

CDK2

CDK9

CYC065可阻断细胞周期G1期的细胞,特异性抑制细胞生长,特别是在表达子宫浆液性癌(USCs)的细胞周期蛋白E1(CCNE1)中。与低CCNE1表达细胞系相比,表达高CCNE1 mRNA和蛋白质水平的USC细胞系对体外CYC065处理显着更敏感(IC50：CCNE1过表达USC细胞系中的平均值±sd = 124.1±57.8 nM对比415在CCNE1低表达子中分别为±117.5nM; P = 0.0003)。重要的是,低浓度的CYC065(即100 nM)仅在CCNE1过表达的USC细胞系(即USC-ARK-2,USC-ARK-7)中导致细胞周期的G1期停滞[1]。 。

为了评估CYC065作为单一药剂的治疗潜力,每天用CYC065(22.5mg/kg)治疗USC-ARK-2衍生的异种移植物,持续3周。每周记录两次肿瘤大小和小鼠体重。与媒介物处理的小鼠相比,CYC065的每日施用导致肿瘤生长显着减少(从治疗的第9天开始P = 0.012)。在整个治疗期间没有报告显着的体重减轻[1]。

在流式细胞术测定中测定CYC065对USC-ARK-1，USC-ARK-2，USC-ARK-7，USC-ARK-4和USC-ARK-6 USC原代细胞系的活力和IC50的影响。 。简言之，将肿瘤细胞接种在六孔板中，并用滴定的CYC065浓度（即，100至500nM）进行处理。 72小时后，收获细胞，洗涤并用碘化丙锭（PI;5μg/ mL）染色用于流式细胞计数。然后，考虑载体处理的细胞100％存活，将活细胞的百分比标准化。使用GraphPad Prism5版本6测定半数最大抑制浓度值。对于药物组合研究，将USC-ARK-1和USC-ARK-2细胞系与Taselisib和CYC065的组合以多种配对浓度（包括IC50）孵育，每个细胞系的IC50 / 2和IC50 * 2与相应的药物（即10％的Taselisib和198nM的CYC065用于USC-ARK-1和50nM的Taselisib和62.5nM的CYC065用于USC-ARK-2） ）。通过组合指数（CI）评估协同作用。 CI值<1定义了组合治疗的协同活性。使用CompuSyn软件[1]计算CI值。

小鼠[1]在源自CCNE1扩增的USC-ARK-2 USC细胞系的异种移植小鼠模型上评估用作单一药剂的CYC065的体内功效。源自CCNE1扩增的PIK3CA突变的USC-ARK-1细胞系的异种移植物用于评估CYC065和Taselisib的体内组合。简言之，将5-7周龄SCID小鼠用USC细胞注射到皮下区域。每组至少使用5只动物。当肿瘤大小为0.125-0.150cm 3时，在肿瘤植入后1周开始通过口服管饲法施用治疗。将子宫浆液性癌-ARK-2衍生的异种移植物分成两组：一组动物接受载体，而实验组接受CYC065（每天22.5mg / kg，持续3周）。将子宫浆液性癌-ARK-1衍生的异种移植物分为四组：一组接受载体（0.5％甲基纤维素-0.2％吐温-80），一组接受CYC065（每天22.5mg / kg，持续3周），一组组接受Taselisib（每日10mg / kg，每周5周，每3周），最后一组接受CYC065和Taselisib的组合。治疗开始时肿瘤的大小为0.125-0.150cm 3。在整个实验期间，每周记录两次小鼠体重和肿瘤大小。计算肿瘤体积。

[1]. Cocco E, et al. Dual CCNE1/PIK3CA targeting is synergistic in CCNE1-amplified/PIK3CA-mutated uterine serous carcinomas in vitro and in vivo. Br J Cancer. 2016 Jul 26;115(3):303-11.

N-[5-[(4-乙基-1-哌嗪基)甲基]-2-吡啶基]-5-氟-4-[4-氟-2-甲基-1-异丙基-1H-苯并咪唑-6-基]-2-嘧啶胺甲烷磺酸盐 | 瑞博西尼 | Dinaciclib | THZ1 | Roscovitine | THZ531 | 2-[[(噻吩-2-基)甲基]氨基]-5-[1-(喹啉-6-基)甲-(Z)-亚基]噻唑-4-酮 | 夫拉平度 | NVP-2 | 阿维西利 | 4-[2-甲基-1-异丙基-1H-咪唑-5-基]-N-[4-(甲磺酰基)苯基]-2-嘧啶胺 | GSK 3抑制剂IX | 肯帕罗酮 | SNS-032 (BMS-387032) | CDK9-IN-2