NVP BGJ398 磷酸盐

Infigratinib phosphate (BGJ-398 phosphate) 是FGFR抑制剂,对FGFR1,FGFR2和FGFR3的IC50分别为0.9,1.4和1 nM,比对FGFR4和VEGFR2的抑制性高40倍,对Abl,Fyn,Kit,Lck和Lyn几乎无活性。

研究领域 >> 癌症

FGFR1:0.9 nM (IC50)

FGFR2:1.4 nM (IC50)

FGFR3:1 nM (IC50)

FGFR4:60 nM (IC50)

Infigratinib磷酸盐抑制FGFR1,FGFR2和FGFR3,IC50 = ~1 nM,FGFR3K650E,IC50 = 4.9 nM,FGFR4,IC50 = 60 nM。所有其他激酶的IC50值均在μM范围内(FYN,LCK,YES和ABL,IC50分别为1.9,2.5,1.1和2.3μM),VEGFR2,KIT和LYN除外,它们在亚微摩尔浓度下被抑制(IC50分别为0.18,0.75和0.3μM)。 Infigratinib抑制FGFR1-,FGFR2-和FGFR3依赖性BaF3细胞的增殖,其IC50值在低纳摩尔范围内,并且与在酶测定中抑制受体激酶活性所观察到的相当。对于剩余的细胞,除VEGFR2(IC50 1449和938 nM)外,所有IC 50值均大于1.5μM,其中对FGFR1,FGFR2和FGFR3的选择性至少为400倍[1]。 Infigratinib(范围在1 nM和10μM之间)有效抑制FGFR2突变子宫内膜癌细胞的细胞生长[2]。

将Infigratinib给予皮下注射RT112/luc1肿瘤的无胸腺裸鼠：在NMP/PEG200(1：9,v/v)中以5 mg/kg静脉推注或在PEG300/D5W中作为悬液灌胃口服(2) ：1,v/v),剂量为20mg/kg。相关的药代动力学(PK)参数表明,该研究中Infigratinib的口服生物利用度为32％。在静脉内给药后,Infigratinib显示从血管隔室到外周组织的快速分布,转化为高体积分布(26L/kg)。血浆清除率高达3.3 L/h/kg(肝脏血流量的61％)。基于AUC口服给药后肿瘤与血浆的比率确定为10 [1]。 Infigratinib(30 mg/kg)显着抑制FGFR2突变的子宫内膜癌异种移植模型的生长[2]。

通过在放射性标记的ATP存在下通过纯化的GST-融合FGFR3-K650E激酶结构域测量合成底物的磷酸化来评估酶激酶活性。通过将10μL的3倍浓缩的Infigratinib溶液或对照与10μL相应的底物混合物（肽底物，ATP和[γ33P] ATP）混合来测量酶活性。通过在测定缓冲液中加入10μL3倍浓度的酶溶液来引发反应。测定组分的最终浓度如下：10 ng GST-FGFR3-K650E，20 mM Tris-HCl，pH 7.5,3 mM MnCl 2,3 mM MgCl 2,1 mM DTT，250μg/ mL PEG20000,2μg / mL聚（EY）4：1,1％DMSO和0.5μMATP（γ-[33P]-ATP0.1μCi）。根据过滤器结合（FB）方法在96孔板中在室温下进行测定10分钟，最终体积为30μL，包括如上所述的组分。通过加入20μL125mMEDTA终止酶促反应，并将33P掺入多肽底物中定量如下：将30μL终止的反应混合物转移到预先浸泡5分钟的Immobilon-PVDF膜上。甲醇，用水冲洗，用0.5％H 3 PO 4浸泡5分钟，并安装在真空歧管上，并使用不连续的真空源。点样后，连接真空，每孔用0.5％H 3 PO 4（200μL）冲洗。除去游离膜并在振荡器上用1％H 3 PO 4洗涤四次并用乙醇洗涤一次。将膜干燥并加入10μL/孔的闪烁液覆盖。最后将板密封并在微孔板闪烁计数器中计数。 IC50值通过NVP-BGJ398抑制百分比的线性回归分析计算[1]。

在补充有10％FBS，4.5g / L葡萄糖，1.5g / L碳酸氢钠和Pen / Strep的RPMI-1640培养基中培养鼠BaF3细胞系。细胞每周传代两次。使用荧光素酶生物发光测定评估化合物介导的对BaF3细胞增殖和活力的抑制。使用μFill液体分配器在新鲜培养基中以50μL/孔将指数生长的BaF3或BaF3Tel-TK细胞接种到384孔板（4250细胞/孔）中。将Infigratinib在DMSO中连续稀释并排列在聚丙烯384孔板中。然后通过使用pintool转移装置将50nL化合物转移到含有细胞的平板中，并将平板在37℃（5％CO 2）下孵育48小时。然后加入25μLBright-Glo，并使用Analyst-GT定量发光。定制曲线拟合软件用于产生百分比细胞活力的逻辑拟合作为抑制剂浓度的对数的函数。 IC50值被确定为将细胞活力降低至50％DMSO对照所需的化合物浓度[1]。

小鼠[1]雌性HsdNpa：使用无胸腺裸鼠。将Infigratinib配制成PEG300 / D5W（2：1，v / v）中的悬浮液，并以10和30mg / kg / qd的剂量口服给药连续12天。通过ANOVA和事后Dunnett检验分析肿瘤和体重数据，用于治疗与对照组的比较。事后Tukey测试用于组内比较。使用GraphPad prism 4.02进行统计分析。作为功效的度量，计算T / C（％）值。大鼠[1]使用6-9周龄的雌性裸Rowett大鼠。将Infigratinib配制成乙酸 - 乙酸盐缓冲液pH4.6 / PEG300（1：1，v / v）中的溶液，每天通过管饲法给予荷瘤大鼠（n = 8）连续20天，剂量为5， 10和15mg / kg / qd（游离碱当量）。施用量为5 mL / kg。用卡尺测量肿瘤体积并根据下式确定：长×宽×高×π/ 6。抗肿瘤活性表示为T / C（％）:(处理动物的肿瘤体积的平均变化/对照动物的肿瘤体积的平均变化）×100。回归（％）计算。

[1]. Guagnano V, et al. Discovery of 3-(2,6-Dichloro-3,5-dimethoxy-phenyl)-1-{6-[4-(4-ethyl-piperazin-1-yl)-phenylamino]-pyrimidin-4-yl}-1-me thyl-urea (NVP-BGJ398), A Potent and Selective Inhibitor of the Fibroblast Growth Factor Receptor Family of Receptor T

[2]. Konecny GE, et al. Activity of the fibroblast growth factor receptor inhibitors dovitinib (TKI258) and NVP-BGJ398 in human endometrial cancer cells. Mol Cancer Ther. 2013 May;12(5):632-42.

尼达尼布 | Infigratinib (BGJ398) | AZD4547 | PD173074 | 厄达替尼 | 8-二氮杂萘-1(2H)-甲酰胺 | 3-四聚丙烯基二氢-2,5-呋喃二酮 | 硫酸类肝素 | 6-[[7-[(1-氨基环丙基)甲氧基]-6-甲氧基-4-喹啉基]氧基]-N-甲基-1-萘甲酰胺 | 盐酸巴多昔芬 | BLU-554 | 多韦替尼 | 罗加替尼 | 4-[(1E)-2-[5-[(1R)-1-(3,5-二氯-4-吡啶基)乙氧基]-1H-吲唑-3-基]乙烯基]-1H-吡唑-1-乙醇 | BLU9931