N-[[四氢-4-(4-苯基-2-噻唑基)-2H-吡喃-4-基]甲基]-3-[5-(三氟甲基)-1,2,4-恶二唑-3-基]苯甲酰胺

TMP269 是一种有效的,选择性的脱乙酰化酶 (HDAC) 抑制剂,能够抑制 HDAC 4/HDAC 5/HDAC 7/HDAC 9,IC50 值分别为 157 nM,97 nM,43 nM 和 23 nM。

研究领域 >> 癌症

HDAC9:23 nM (IC50)

HDAC7:43 nM (IC50)

HDAC5:97 nM (IC50)

HDAC4:157 nM (IC50)

HDAC8:42000 nM (IC50)

HDAC6:82000 nM (IC50)

TMP269对10μM的人CD4 + T细胞的线粒体活性和/或活力没有影响,可用作鉴定IIa类HDAC酶的内源底物的工具[1]。在IEC-18肠上皮细胞中,TMP269阻止细胞周期进程,DNA合成和响应G蛋白偶联受体/ PKD1激活诱导的增殖[2]。与HDAC4敲低一样,TMP269显着增强由CFZ诱导的MM细胞系中的细胞毒性,上调ATF4和CHOP并诱导细胞凋亡。 TMP269在MM细胞系中没有高度乙酰化组蛋白H3K9或α-微管蛋白,证实它对I类或IIb类HDAC没有抑制作用。以剂量依赖的方式,TPM269诱导的细胞毒性与caspase-8,-9,-3和PARP的切割相关,与细胞凋亡一致[3]。

剂量 - 反应研究在三倍稀释系列中进行，反应混合物中最大最终化合物浓度为100μM。所有测定均基于与上述HDAC9测定相同的原理：HDAC对荧光肽底物上的乙酰化或三氟乙酰化赖氨酸残基的脱乙酰化。 HDAC1，HDAC2，HDAC3，HDAC6，HDAC10和HDAC11使用基于p53的残基379-382（Arg-His-Lys-Lys（Ac））的底物。对于HDAC8，使用基于p53（Arg-His-Lys（Ac）-Lys（Ac））的残基379-382的二乙酰化肽底物。 HDAC4，HDAC5，HDAC7和HDAC9测定使用IIa类HDAC特异性荧光底物（Boc-Lys（三氟乙酰基）-AMC）。用含有1％DMSO终浓度的测定缓冲液（50mM Tris-HCl，pH 8.0,137mM NaCl，2.7mM KCl，1mM MgCl 2,1mg / mL BSA）中的50μMHDAC底物进行所有反应;在30℃下孵育2小时;并用曲古抑菌素A和胰蛋白酶开发。

根据制造商的说明书（RosetteSep Human CD4 + T细胞富集试剂盒）通过阴性选择从全血中分离人CD4 + T细胞，重悬于T细胞培养基（10％FBS，2mM L-谷氨酰胺，1mM丙酮酸盐， 10mM HEPES，10U / 10mg青霉素/链霉素，0.5％DMSO的RPMI溶液）并以50,000个细胞/孔接种IL-2（10BRMP单位/ mL）和100,000个人T-扩增剂Dynabeads 72小时。根据制造商的说明书（细胞增殖测定试剂盒I（MTT））进行线粒体功能或细胞活力的测定，并表示为对照（无抑制剂）孔的百分比。

[1]. Lobera M, et al. Selective class IIa histone deacetylase inhibition via a nonchelating zinc-binding group. Nat Chem Biol. 2013 May;9(5):319-25.

[2]. Sinnett-Smith J, et al. Protein kinase D1 mediates class IIa histone deacetylase phosphorylation and nuclear extrusion in intestinal epithelial cells: role in mitogenic signaling. Am J Physiol Cell Physiol. 2014 May 15;306(10):C961-71.

[3]. Kikuchi S, et al. Class IIa HDAC inhibition enhances ER stress-mediated cell death in multiple myeloma. Leukemia. 2015 Sep;29(9):1918-1927.

曲古柳菌素A | 恩替诺特 | 罗米地辛 | 阿比特龙 | Ricolinostat (ACY-1215) | 丁酸钠 | RGFP966 | JNJ-26481585 | HDAC6 抑制剂 | 萝卜硫素 | N-羟基-2-[[[2-(6-甲氧基吡啶-3-基)-4-(吗啉-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基]甲基](甲基)氨基]嘧啶-5-甲酰胺 | N-[[6-(羟基氨基)-6-氧代己基]氧基]-3,5-二甲基-苯甲酰胺 | 4-乙酰氨基-N-(2'-氨基苯基)-苯甲酰胺 | Tubastatin A | 4-苯基丁酸钠盐