H100

H100 是一种氯离子运输 (Cl- transport) 抑制剂,可以部分抑制氯离子载体 NaK2Cl cotransporter 和 Band 3 anion exchanger,但是对 KCl cotransporter 无作用。

信号通路 >> 跨膜转运 >> 氯离子通道

研究领域 >> 其他

Cl- transport[1]

H100是Cl-转运抑制剂,对NaK2Cl协同转运蛋白(NKCC)和Band 3阴离子交换蛋白(AE)具有部分作用,但对人红细胞中的KCl协同转运蛋白(KCC)没有影响。 H100(0.1mM)显示人红细胞中NKCC和AE的抑制率为63％和74％[1]。

35SO42-外排用作Band 3阴离子交换剂（AE）活性的方便测量。将红细胞悬浮于含有Na 2 SO 4而不是NaCl的MBS中，并在37℃下孵育30分钟。然后将细胞悬浮液离心（3,000g，5分钟）并除去上清液。重复上述过程两次以确保用SO42-细胞内替换Cl-。为了用放射性标记加载红细胞，将填充的细胞在含有1份SO42-MBS和9份含有（以mM计）300蔗糖和10MOPS（pH7.4,300±）的培养基的溶液中重新悬浮至约50％血细胞比容。将5mOsm）置于微量离心管中。然后加入10μCi的35SO42-并将悬浮液在37℃下孵育1小时。在此期间结束时，然后通过在冰冷的SO42-MBS中离心（10,000g，10s）将细胞洗涤四次。将所有抑制剂（H100）溶解在DMSO或MBS中，并在加入放射性同位素之前加入细胞悬浮液中[1]。

[1]. Culliford S1, et al. Specificity of classical and putative Cl(-) transport inhibitors on membrane transport pathways in human erythrocytes. Cell Physiol Biochem. 2003;13(4):181-8.

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