GSK269962A

GSK269962A 是一种有效的 ROCK 抑制剂,作用于重组人 ROCK1 和 ROCK2,IC50 分别为 1.6 和 4 nM。

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研究领域 >> 心血管疾病

ROCK1:1.6 nM (IC50)

ROCK2:4 nM (IC50)

RSK1:132 nM (IC50)

MSK1:49 nM (IC50)

AKT1:955 nM (IC50)

AKT2:1350 nM (IC50)

AKT3:1510 nM (IC50)

CDK2:3500 nM (IC50)

GSK3α:1260 nM (IC50)

GSK269962A对重组人ROCK1的IC50值为1.6nM。 GSK269962A对一组丝氨酸/苏氨酸激酶的选择性也超过30倍。 GSK269962A在预收缩的大鼠主动脉中诱导血管舒张,IC50为35 nM。两者对人类ROCK1都非常有效,GSK269962A的IC50为1.6 nM。另一方面,GSK269962A具有显着改善的激酶选择性特征,对所测试的蛋白激酶组具有至少> 30倍的选择性[1]。

口服GSK269965A(0.3,1和3mg/kg)诱导自发性高血压大鼠(SHR)血压的剂量依赖性降低。血压的降低是急剧而严重的。在两种化合物的口服强饲后约2小时观察到对血压的最大影响。在类似的情况下,口服Y-27632(10和30mg/kg)也诱导剂量依赖性的血压降低。对于所有三种Rho激酶抑制剂,血压的降低伴随着心率的急性剂量依赖性增加,可能是由于压力反射机制的激活[1]。

使用闪烁亲近测定法测定纯化的ROCK1（3-543）的酶活性和动力学。在该测定中，将纯化的ROCK1与肽底物（生物素-Ahx-AKRRLSSLRA-CONH2）和33ATP一起温育，随后通过链霉抗生物素蛋白珠捕获定量33P进入肽中。对于IC50测定，将测试化合物以10mM溶于100％DMSO中，随后在100％DMSO中连续稀释。通常在11点稀释范围内测定化合物，测定中的浓度为3倍稀释中的10μM至0.2nM。对于剂量 - 反应曲线，数据被归一化并表示为抑制百分比，使用公式100×[（U-C1）/（C2-C1）]，其中U是未知值，C1是高信号的平均值（0 ％）对照孔，C2是低信号（100％）对照孔的平均值。进行曲线拟合将每种化合物的结果记录为pIC50值[1]。

大鼠[1]雄性Sprague-Dawley大鼠（350-400g）用O 2中的5％异氟烷麻醉并通过放血杀死。长度约为2至3毫米的主动脉环由两个0.1毫米直径的钨丝钩悬挂在含有以下组成的克雷布斯的10毫升组织浴中：112毫升NaCl，4.7 mM KCl，2.5 mM CaCl 2,1.2 mM KH2PO2， 1.2mM MgSO 4,25mM NaHCO 3,11.0mM右旋糖，0.01mM吲哚美辛和0.01mM L-NAME。将Krebs维持在37℃并用95％O 2,5％CO 2，pH 7.4充气。使用耦合到模型7D测谎仪的FT03力 - 位移传感器在最佳静止张力（1g）下测量等长力的变化。在60分钟的平衡期后，用标准浓度的KCl（60mM）和去氧肾上腺素（1μM）处理血管。通过以0.5-log单位间隔（1nM至10μM）给药，获得每种组织的对去氧肾上腺素的累积浓度 - 响应曲线。在几次洗涤后，每个容器与EC80浓度的去氧肾上腺素收缩至平衡，并通过以0.5-log单位间隔（0.1nM至1μM）添加累积量的GSK269962A或SB-772077-B来逆转色调。响应表示为用去氧肾上腺素建立的音调的百分比逆转。

[1]. Doe C, et al. Novel Rho kinase inhibitors with anti-inflammatory and vasodilatory activities. J Pharmacol Exp Ther. 2007 Jan;320(1):89-98.

Y-27632 2HCl | 盐酸法舒地尔 | 2-[3-[4-[(1H-吲唑-5-基)氨基]喹唑啉-2-基]苯氧基]-N-异丙基乙酰胺 | 水仙环素 | Y-39983 HCl | Thiazovivin | GSK429286A | GSK180736A | SR3677 | Azaindole 1 | 盐酸瑞舒地尔 | 1-(3-羟基苄基)-3-[4-(吡啶-4-基)噻唑-2-基]脲 | LX7101 | Chroman 1 | H-1152二盐酸盐