Voxtalisib

Voxtalisib (XL-765) 是一种有效的 PI3K 抑制剂,抑制p110α,p110β,p110γ 和 p110δ,IC50 分别为 39, 113, 9 和 43 nM,也抑制 DNA-PK (IC50=150 nM) 和 mTOR (IC50=157 nM)。Voxtalisib (XL-765) 抑制 mTORC1 和 mTORC2,IC50s 分别为 160 和 910 nM。

研究领域 >> 癌症

p110α:39 nM (IC50)

p110β:113 nM (IC50)

p110δ:43 nM (IC50)

p110γ:9 nM (IC50)

mTOR:157 nM (IC50)

mTORC1:160 nM (IC50)

mTORC2:910 nM (IC50)

DNA-PK:150 nM (IC50)

Voxtalisib(XL-765)显示出对I类PI3K同种型p110α,p110β,p110δ和p120γ的有效抑制活性,IC50分别为39,110,43和9nM。在各种浓度的ATP下测定Voxtalisib(XL-765)抑制PI3Kα的IC50值,显示Voxtalisib(XL-765)是ATP竞争性抑制剂,平衡抑制常数(Ki)值为13 nM。 Voxtalisib(XL-765)在免疫复合物激酶测定和PI3K相关激酶DNA-PK(IC50值150nM)中也抑制mTOR(mTORC1和mTORC2的IC50分别为160和910nM)。相反,Voxtalisib(XL-765)对III类PI3K液泡分选蛋白34(VPS34; IC50值~9.1μM)具有相对弱的抑制活性。与其对纯化的PI3K蛋白的抑制活性一致,SAR245409抑制EGF诱导的PC-3和MCF7细胞中PIP3的产生,IC50分别为290和170nM。 Voxtalisib(XL-765)抑制PI3K下游关键信号蛋白磷酸化的能力通过基于细胞的ELISA评估其对EGF刺激的AKT磷酸化和未刺激的PC-3细胞中S6的磷酸化的影响来检测。 Voxtalisib(XL-765)抑制这些活性,IC50分别为250和120 nM。在MCF7和PC-3细胞中,Voxtalisib(XL-765)抑制增殖(通过BrdUrd掺入监测),IC50分别为1,070和1,840nM。为了进一步表征Voxtalisib(XL-765)对肿瘤细胞生长的影响,使用了在14天的时间内监测软琼脂中PC-3和MCF7细胞的贴壁依赖性生长的测定。 SAR245409抑制集落生长,PC-3细胞IC50值为270 nM,MCF7细胞IC50值为230 nM [2]。

Voxtalisib(XL-765)的口服给药引起肿瘤中AKT,p70S6K和S6的磷酸化的剂量依赖性降低,在4小时时达到最大84％的S6磷酸化抑制,30mg/kg。剂量-反应关系来自4小时时间点,预测在19 mg/kg(pAKTT308和pAKTS473),51 mg/kg(p-p70S6K)剂量下,AKT,p70S6K和S6磷酸化的50％抑制作用,以及18 mg/kg(pS6)。在30mg/kg剂量的Voxtalisib(XL-765)后,MCF7肿瘤中AKT,p70S6K和S6磷酸化的抑制在4小时时最大,达到61％至84％;然而,抑制水平在24小时内降低至0％至42％,并且在48小时内显着的抑制作用很小或没有。在100mg/kg剂量的Voxtalisib(XL-765)后,抑制在4小时时也是最大的(52％-75％)[2]。

使用Cell Proliferation ELISA，Bromodeoxyuridine Chemiluminescence Kit评估细胞增殖。使用ATP生物发光测定评估细胞毒性如下：PC-3，MCF7，A549，LS174T，MDA-MB-468，U87-MG和OVCAR-3细胞以7×103,1.5×104,6的密度接种。将×103,7×103,7×103,6×103,1.5×104个细胞/孔分别置于培养基中的96孔微量滴定板上，在37℃，5％CO 2下培养18小时，然后处理在含有最终浓度为0.3％DMSO的培养基中连续稀释化合物。每个化合物浓度使用一式三份的孔。对照孔在培养基中接受0.3％DMSO。将培养物在37℃，5％CO 2下再培养24小时，然后使用ViaLight HS试剂盒测定细胞的活力[2]。

小鼠[2]在无胸腺裸鼠中进行体内功效研究。将肿瘤细胞在补充有10％FBS（20％用于PC-3和OVCAR-3细胞），青霉素 - 链霉素和非必需氨基酸的DMEM中在37℃，湿润的5％CO 2气氛中培养。在第0天，通过短暂的胰蛋白酶消化收获细胞，并将0.1至5×10×10 6个细胞在0.1mL冰冷的汉克斯平衡盐溶液中皮下植入（OVCAR-3）或皮内（MCF7和U-87MG）至后胁腹。女性无胸腺裸鼠。在MCF7模型的情况下，在肿瘤细胞植入时将雌激素沉淀（IRA）皮下植入颈背。类似地收获总共3×106个PC-3细胞并皮下植入5-8周龄雄性裸鼠的后胁腹。每周用卡尺监测肿瘤生长直至分期和剂量开始。在给药期间，评估身体和肿瘤重量。将Voxtalisib（XL-765）配制在无菌水/ 10mM HCl或水中，并以指定剂量和方案通过口服管饲法以10mL / kg的剂量体积施用。

[1]. Garcia-Echeverria C, et al. Drug discovery approaches targeting the PI3K/Akt pathway in cancer. Oncogene. 2008 Sep 18;27(41):5511-26.

[2]. Yu P, et al. Characterization of the activity of the PI3K/mTOR inhibitor XL765 (SAR245409) in tumor models with diverse genetic alterations affecting the PI3K pathway. Mol Cancer Ther. 2014 May;13(5):1078-91.

雷帕霉素 | 3-甲基腺嘌呤 | LY294002 | 渥曼青霉素 | Alpelisib (BYL719) | Torin 1 | 5-[2,6-二(4-吗啉基)-4-嘧啶基]-4-(三氟甲基)-2-吡啶胺 | IPI549 | MHY1485 | 沙帕色替 | AZD8055 | 2-氨基-N-[2,3-二氢-7-甲氧基-8-[3-(4-吗啉基)丙氧基]咪唑并[1,2-c]喹唑啉-5-基]-5-嘧啶甲酰胺 | 艾代拉里斯 | Dactolisib (BEZ235) | 槲皮素