934162-61-5

• 常用中文名：2-[2-氟-4-[(2S)-2-吡咯烷基]苯基]-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
• 常用英文名：A-966492
• CAS号：934162-61-5
• 分子式：C₁₈H₁₇FN₄O
• 分子量：324.352
• 相关类别： 生物化工 抑制剂 DNA损伤(DNA Damage) PARP 抑制剂
• 发布时间：2018-12-15 19:22:45
• 更新时间：2024-01-11 10:56:43
• A-966492 是一种新颖的,有效的 PARP1 和 PARP2 抑制剂,Ki 值为 1 nM 和 1.5 nM。

名称

• 中文名: 2-[2-氟-4-[(2S)-2-吡咯烷基]苯基]-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺
• 英文名: 2-[2-fluoro-4-[(2S)-pyrrolidin-2-yl]phenyl]-1H-benzimidazole-4-carboxamide
• 英文别名: 1H-Benzimidazole-7-carboxamide, 2-[2-fluoro-4-[(2S)-2-pyrrolidinyl]phenyl]-; ex-7208; qcr-142; x7570; 2-{2-Fluoro-4-[(2S)-2-pyrrolidinyl]phenyl}-1H-benzimidazole-4-carboxamide; A-966492

物化性质

• 密度: 1.3±0.1 g/cm3
• 沸点: 605.5±65.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₁₈H₁₇FN₄O
• 分子量: 324.352
• 闪点: 320.0±34.3 °C
• 精确质量: 324.138641
• PSA: 84.79000
• LogP: 0.96
• 外观性状: 粉末
• 蒸汽压: 0.0±1.7 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.665
• 储存条件: -20℃

生物活性

• 描述: A-966492 是一种新颖的,有效的 PARP1 和 PARP2 抑制剂,Ki 值为 1 nM 和 1.5 nM。
• 相关类别:
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  PARP-1:1 nM (Ki)

  PARP-2:1.5 nM (Ki)

• 体外研究: A-966492是最有效的PARP抑制剂之一。在全细胞试验中,A-966492显示出对PARP-1酶的优异效力,Ki为1nM,EC50为1nM。 A-966492以剂量依赖性方式显着增强TMZ的功效。此外,A-966492在多个物种中具有口服生物利用度,穿过血脑屏障,并且似乎分布到肿瘤组织中。 A-966492代表了一种有前途的,结构多样的苯并咪唑类似物,并且在临床前进一步表征[1]。
• 体内研究: A-966492在B16F10皮下鼠黑色素瘤模型中与替莫唑胺组合以及在MX-1乳腺癌异种移植模型中显示出良好的体内功效,作为单一药剂和与卡铂组合。此外,A-966492具有优异的药物性质,并且已经证明了与TMZ和卡铂组合的临床前小鼠肿瘤模型的体内功效,以及BRCA1缺陷型MX-1肿瘤模型中的单一药剂活性。 A-966492的进一步特征在于Sprague-Dawley大鼠,比格犬和食蟹猴,A-966492表明口服生物利用度为34-72％,半衰期为1.7-1.9小时。在体内,A-966492证明了TMZ在鼠B16F10同基因黑素瘤模型中的功效的显着增强,其中A-966492组合组显示出优异的功效[1]。
• 激酶实验: 酶测定在含有50mM Tris，pH 8.0,1mM二硫苏糖醇（DTT）和4mM MgCl 2的缓冲液中进行。 PARP反应含有1.5μM[3H] -NAD +（1.6μCi/ mmol），200nM生物素化组蛋白H1,200nM slDNA和1nM PARP-1或4nM PARP-2酶。利用基于SPA珠的检测的自身反应在白色96孔板中以100μL体积进行。通过向50μL含有PARP和DNA的2x酶混合物中加入50μL的2X NAD +底物混合物来引发反应。通过加入150μL的1.5mM苯甲酰胺终止这些反应（相对于其IC 50约为1×103倍）。将170μL量的终止反应混合物转移至链霉抗生物素蛋白包被的闪板上，温育1小时，并使用TopCount微孔板闪烁计数器计数。 Ki数据由各种底物浓度下的抑制曲线确定。
• 细胞实验: 将C41细胞用A-966492在96孔板中处理30分钟。用1mM H 2 O 2破坏DNA 10分钟激活PARP。用冰冷的磷酸盐缓冲盐水（PBS）洗涤细胞一次，并用预冷的甲醇/丙酮（7：3）在-20℃下固定10分钟。将它们风干后，将板用PBS再水合并用PBS-Tween（0.05％）（封闭溶液）中的5％脱脂奶粉在室温下封闭30分钟。将细胞与抗PAR抗体10H（1:50）在封闭溶液中在室温下孵育60分钟，然后用PBS-Tween20洗涤五次，并与山羊抗小鼠荧光素5（6） - 异硫氰酸酯（FITC）一起孵育 - 偶联抗体（1:50）和1μg/ mL 40,6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）在室温下封闭溶液中60分钟。用PBS-Tween20洗涤5次后，使用设定在FITC的激发和发射波长的fmax荧光微孔板读数器或DAPI的激发和发射波长进行分析。 PARP活性（FITC信号）用细胞数（DAPI）标准化。
• 动物实验: 在研究第0天，将0.2cc量的1:10稀释的45％基质胶和45％Spinner MEM中的肿瘤brei皮下注射到雌性SCID小鼠的胁腹中。使肿瘤生长至指定大小，然后随机化至治疗组（N = 10只小鼠/组）。 PARP抑制剂治疗在第14天开始，在第16天开始顺铂治疗。在肿瘤接种后的不同间隔，使用校准的微量捕获器连续测量各个肿瘤尺寸，并计算肿瘤体积。
• 参考文献:

  [1]. Penning TD, et al. Optimization of phenyl-substituted benzimidazole carboxamide poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors: identification of (S)-2-(2-fluoro-4-(pyrrolidin-2-yl)phenyl)-1H-benzimidazole-4-carboxamide (A-966492), a highly potent and efficacious