| 描述 |
Banoxantrone dihydrochloride 是一种新型生物还原剂,可还原成稳定的 DNA 亲和性化合物 AQ4,AQ4 是一种有效的拓扑异构酶II抑制剂。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
Topoisomerase II
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| 体外研究 |
Banoxantrone(AQ4N)可以在缺氧环境中还原为稳定的DNA亲和试剂AQ4。 AQ4是一种有效的拓扑异构酶II抑制剂,能够在肿瘤充分氧合的细胞受到辐射损伤后破坏细胞周期中募集的细胞[1]。在9L大鼠胶质肉瘤和H460人非小细胞肺癌细胞的培养物中,对于缺氧,Banoxantrone的细胞毒性比常氧高8倍以上,但对于其他11种人癌细胞系则没有。 DT-diaphorase蛋白水平和banoxantrone化学敏感性在癌细胞系小组之间的相关性很差,并且banoxantrone化学敏感性不受DT-心肌黄酶抑制剂的影响[2]。 Banoxantrone是一种双-N-氧化物,通过两个连续的双电子还原还原成叔胺AQ4,它是对有氧和缺氧细胞都有效的细胞毒性剂。 AQ4,但不是AQ4N,以高亲和力嵌入DNA中以产生稳定的持久复合物,其可抑制拓扑异构酶II并导致DNA损伤和细胞死亡[3]。
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| 体内研究 |
Banoxantrone(200 mg/kg)显着增强辐射引起的肿瘤生长延迟。当以单剂量(12Gy)和多组分方案(5×3Gy)施用辐射时发生这种情况。对Banoxantrone(AQ4N)给药方案的研究表明,有一个很长的时间段可以引发最大效应(辐射后4天至6小时给药)。这些结果表明,Banoxantrone作为生物还原药具有显着的潜力[1]。在体内激活banoxantrone细胞毒性需要肿瘤缺氧,这种缺氧比通过血管舒张或抗血管生成药物治疗可以更容易地实现[2]。因此,将banoxantrone纳入常规化学放射方案中针对肿瘤的氧合区和缺氧区,并且可能提高治疗的有效性。单次剂量的60mg/kg banoxantrone增强了RT112(膀胱)和Calu-6(肺)异种移植物对顺铂和放射治疗的反应。 Banoxantrone将增加临床前模型中放化疗的疗效[3]。
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| 激酶实验 |
切除未处理的T50 / 80肿瘤（6.5-9.0mm几何直径（GMD），并在冰冷的磷酸盐缓冲盐水（PBS）中通过机械破碎轻轻解聚。通过40μm筛网过滤制备单细胞悬浮液。离心并重悬于Eagle含有10％胎牛血清（FCS）的最低必需培养基（EMEM）中，浓度为106个细胞/ mL。将细胞（20 mL）置于125 mL橡胶密封玻璃瓶中，加热2 h。在37°C下提供氧气化条件，即95％空气/ 5％二氧化碳或低氧条件95％N2 / 5％CO2。在此期间的最后90分钟内通过注射加入Banoxantrone（AQ4N）（20μM）密封盖子。洗去药物，将细胞重新悬浮在新鲜培养基中。为了分析DNA损伤，在此过程后0到96小时的不同时间处理等分试样（105个细胞）。评估维持切除的肿瘤细胞的效果在培养中，样品也保持在将培养基在37℃，95％空气/ 5％CO 2下培养24小时。然后收获悬浮生长的细胞并置于玻璃瓶中，进行上述实验。每个实验进行两次，结果合并[1]。
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| 动物实验 |
使用小鼠[1] T50 / 80荷瘤小鼠。当肿瘤达到6.5-9.0mm的几何直径（GMD）时，进行这些实验。 Banoxantrone（AQ4N）以200mg / kg的剂量单次ip注射给药。在单剂量X射线照射12Gy（300kVp西门子Stabilipan，剂量率为2.56Gy min-1）之前给药30分钟。在治疗后的一系列时间切除肿瘤并置于冰上。如上所述，在冰冷的PBS中制备单细胞悬浮液。离心后，将细胞在含有10％FCS（1×10 6个细胞/ mL）的冷EMEM中稀释。在彗星试验中使用100μL该悬浮液的等分试样。对于在照射后0至120小时的不同时间间隔切除的肿瘤进行该程序。结果汇集在三个单独的实验中。
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| 参考文献 |
[1]. Hejmadi MV, et al. DNA damage following combination of radiation with the bioreductive drug AQ4N: possible selective toxicity to oxic and hypoxic tumour cells. Br J Cancer. 1996 Feb;73(4):499-505. [2]. Manley E Jr, et al. Impact of tumor blood flow modulation on tumor sensitivity to the bioreductive drug banoxantrone. J Pharmacol Exp Ther. 2013 Feb;344(2):368-77. [3]. Williams KJ, et al. In vivo activation of the hypoxia-targeted cytotoxin AQ4N in human tumor xenografts. Mol Cancer Ther. 2009 Dec;8(12):3266-75.
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