| 描述 |
AG14361 是一种有效的 PARP-1 抑制剂,Ki 值 < 5 nM,在通透的 SW620 细胞和完整的 SW620 细胞中,抑制 PARP-1 的活性,IC50 值分别为 29 nM 和 14 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
PARP-1:0.5 nM (Ki)
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| 体外研究 |
AG14361是一种有效的PARP-1抑制剂,Ki <5 nM,在透化的SW620和完整的SW620细胞中,IC50分别为29 nM和14 nM。 AG14361抑制人癌细胞(例如A549,LoVo和SW620细胞)的增殖,GI50分别为14μM,11.2μM和20μM。此外,AG14361与替莫唑胺联合显着降低了替莫唑胺在LoVo和A549细胞中的GI50值,但在SW620细胞中没有发挥这种作用[1]。对于92 J-wt-BRCA1和92 J-sh-BRCA1细胞,AG14361抑制乳腺癌细胞,IC50分别为17μM和25μM。 AG14361诱导caspase 3/7激活和细胞周期异常,并抑制NF-κB信号传导[2]。 AG14361(0.4μM)增强拓扑异构酶I毒物的生长抑制和细胞毒性作用,对可切割复合物的形成和逆转没有明显影响,并增加喜树碱诱导的DNA单链断裂的持久性[3]。
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| 体内研究 |
AG14361(5和15mg/kg,ip)没有毒性并且不抑制肿瘤的生长。然而,当与替莫唑胺组合时,AG14361显着增强对抗LoVo异种移植物的替莫唑胺活性并延迟肿瘤生长。照射前AG14361(15mg/kg,ip)处理显着增加了对携带LoVo异种移植物的小鼠的放射治疗的敏感性[1]。 AG14361(30 mg/kg)协同lestaurtinib活性抑制同种异体移植物中的乳腺癌肿瘤[2]。
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| 激酶实验 |
在含有20 nM PARP-1,500μMNAD+加[32P] NAD +（每反应混合物0.1-0.3μCi）和活化小牛胸腺DNA（10μg）的反应混合物中测量全长重组人PARP-1的活性。 / mL）在25°C; 4分钟后，加入冰冷的10％（wt / vol）三氯乙酸终止反应。将掺入酸不溶性材料中的反应产物[32P] ADP-核糖用微滤装置沉积在Whatman GF / C玻璃纤维滤器上，并用PhosphorImager定量。测量AG14361在0-600nM下对PARP-1活性的抑制，并通过非线性回归分析计算AG14361的Ki [1]。
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| 细胞实验 |
使用96孔板和MTT中代谢活性细胞的荧光素酶偶联ATP量化测定进行细胞活力测定。对于MTT，在24孔板的每个孔中铺板1至2×10 4个细胞。将各种浓度的靶药物（AG14361）溶解在DMSO中，然后加入含有10％胎牛血清的Dulbecco改良的Eagle培养基（DMEM）中的细胞中，还向每个孔中加入IC50浓度的AG14361。加入培养基后，最终的DMSO浓度保持在0.1％。 48小时后，除去培养基，在每个孔中加入0.3mL 0.1％MTT的磷酸盐缓冲盐水（PBS）。在37℃CO 2培养箱中孵育30分钟后，除去MTT溶液并加入0.8mL 2-丙醇。摇动30分钟后，使用读板器测量OD560。每个时间点的电镀一式三份[2]。
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| 动物实验 |
携带可触知的皮下SW620或LoVo异种移植物的CD-1裸鼠每天单独用生理盐水（对照动物）或AG14361（5或15mg / kg）腹膜内处理5天（每组5只小鼠）。对于药物组合，AG14361每天腹膜内给药5天，然后立即给予细胞毒性药物（替莫唑胺口服68 mg / kg或腹腔注射2.5 mg / kg伊立替康）或30分钟后局部应用2 Gy的x射线照射肿瘤每天5天。从二维卡尺测量和方程a2×b / 2（其中a是宽度，b是肿瘤的长度）确定的肿瘤体积表示为中值相对肿瘤体积（RTV）。也就是说，RTV1是治疗初始（第0天）的肿瘤体积，RTV4是肿瘤体积的4倍，是治疗的第一天。肿瘤生长延迟定义为药物处理或辐射小鼠中RTV4的时间与对照（仅载体）小鼠中RTV4的时间相比[1]。
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| 参考文献 |
[1]. Calabrese CR, et al. Anticancer chemosensitization and radiosensitization by the novel poly(ADP-ribose) polymerase-1 inhibitor AG14361. J Natl Cancer Inst. 2004 Jan 7;96(1):56-67. [2]. Vazquez-Ortiz G, et al. Drug repurposing screen identifies lestaurtinib amplifies the ability of the poly (ADP-ribose) polymerase 1 inhibitor AG14361 to kill breast cancer associated gene-1 mutant and wild type breast cancer cells. Breast Cancer Res. 2014 Jun 24;16(3):R67. [3]. Smith LM, et al. The novel poly(ADP-Ribose) polymerase inhibitor, AG14361, sensitizes cells to topoisomerase I poisons by increasing the persistence of DNA strand breaks. Clin Cancer Res. 2005 Dec 1;11(23):8449-57.
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