<生产厂家价格>

AZD8055

AZD8055用途

AZD-8055 是一种ATP竞争性的 mTOR 抑制剂,IC50 为 0.8 nM。AZD-8055 抑制 mTORC1 和 mTORC2。

AZD8055名称

[ CAS 号 ]:
1009298-09-2

[ 中文名 ]:
[5-[2,4-二((3S)-3-甲基吗啉-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基]-2-甲氧基苯基]甲醇

[ 英文名 ]:
AZD8055

[中文别名 ]:

[英文别名 ]:

AZD-8055
AZD8055

AZD8055生物活性

[ 描述 ]:

AZD-8055 是一种ATP竞争性的 mTOR 抑制剂,IC50 为 0.8 nM。AZD-8055 抑制 mTORC1 和 mTORC2。

[ 相关类别 ]:

信号通路 >> 自噬 >> 自噬

信号通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信号通路 >> mTOR

研究领域 >> 癌症

[ 靶点 ]

mTOR:0.8 nM (IC50)

mTORC1

mTORC2

Autophagy

[体外研究]

使用两种不同的测定评估AZD-8055(AZD8055)对mTOR的抑制活性。使用截短的重组mTOR酶,AZD8055的IC 50为0.13±0.05nM。使用从HeLa细胞提取的天然mTOR酶复合物,IC50为0.8±0.2nM。 AZD-8055对所有I类PI3K同种型和PI3K样激酶家族的其他成员显示出优异的选择性(~1,000倍)。 AZD-8055抑制mTORC1底物p70S6K和4E-BP1的磷酸化以及mTORC2底物AKT和下游蛋白的磷酸化。对于pAKT Ser473,AZD8055的细胞IC50计算为24±9nM(n = 13),对于MDA-MB-468细胞中的pS6Ser235/236计算为27±3nM(n = 12)[1]。

[体内研究]

在携带U87-MG(PTEN null)胶质母细胞瘤异种移植物的小鼠中,用AZD-8055(AZD8055)口服治疗导致剂量依赖性肿瘤生长抑制为33％,48％和77％,2.5,5和10mg/kg/d每天两次。在携带A549异种移植物的裸鼠中观察到类似的剂量依赖性：分别在2.5,5和10mg/kg/d每天两次后,肿瘤生长抑制分别为44％,55％和93％。当以10mg/kg每天两次或每天以20mg/kg的剂量给药时,AZD8055还导致乳腺癌,肺癌,结肠癌,前列腺癌和子宫异种移植物模型中肿瘤生长和/或消退的显着抑制[1]。 AZD8055显着降低mTOR及其底物的磷酸化水平和体内小胶质细胞的活化,并促进从M1表型到M2表型的小胶质细胞极化。此外,蛛网膜下腔出血(SAH)后AZD8055的使用可显着改善EBI,包括神经细胞凋亡,神经元坏死,脑水肿和血脑屏障通透性[2]。

[激酶实验]

使用两种方法评估mTOR的抑制：高通量测定使用α筛选捕获复合物技术，其具有重组截短的FLAG标记的mTOR（氨基酸1362-2549;在HEK293细胞中表达）和生物素化的p70肽底物。此外，使用来自HeLa细胞质提取物的全长mTOR的免疫沉淀测定天然mTOR活性，并且内源性mTOR与Rictor和Raptor在蛋白质复合物中。在作为底物的重组4E-BP1蛋白存在下进行激酶测定，通过ELISA形式检测磷酸化产物。使用脂质PIP2作为底物的重组PI3K测量脂质激酶，I类PI3Ksα，β，δ和γ的活性。进行共济失调 - 毛细血管扩张症突变（ATM）和DNA-PK的测定。最后，针对260种激酶的反筛选以10μMAZD-8055的固定浓度进行[1]。

[细胞实验]

对于生长抑制和吖啶染色，将细胞暴露于增加浓度的AZD-8055（0至1,280nM）72至96小时并染色细胞核（0.03mg / mL Hoechst 33342）和酸性囊泡（1μg/ mL吖啶）橙子）。在ArrayScan II平台上以450和536nm捕获图像，并且量化酸性囊泡的百分比和细胞数量。对于LC3评估，在与AZD8055孵育之前，将细胞暴露于e64d /胃蛋白酶抑制剂（10μg/ mL）30至90分钟。将细胞在冰上裂解并通过免疫印迹分析[1]。

[动物实验]

小鼠[1]以0.1mL的体积皮下注射肿瘤细胞（U87-MG为106，A549为5×106），当肿瘤大小达到0.2cm 3时，将小鼠随机分为对照组和治疗组。 AZD-8055通过口服强饲法（0.1mL / 10g体重）每日一次或两次给药。对照组仅接收车辆。在研究期间每周两次记录肿瘤体积（通过厚度测量），动物体重和肿瘤状况。计算肿瘤体积。使用大鼠[2] Sprague-Dawley（SD）大鼠（250g）和妊娠SD大鼠（妊娠16-18天，用于小胶质细胞提取）。在实验1中，将48只大鼠（使用54只大鼠，48只大鼠在手术后存活）随机分为4组：假手术组，SAH 3小时组，SAH 24小时组，SAH 72小时组。 SAH 3小时，24小时和72小时组的动物进行实验性SAH，并分别在注射后3小时，24小时和72小时处死（每组n = 12）。在实验2中，将72只大鼠（使用83只大鼠，72只大鼠在手术后存活）随机分配到假手术组（n = 18），SAH +媒介物组（n = 18），SAH +雷帕霉素组（n = 18）。，SAH + AZD8055组（n = 18）。在诱导SAH后立即大鼠接受单次腹膜内注射雷帕霉素，所用雷帕霉素的剂量为150μg/ kg体重。 AZD8055通过口服强饲法给药，剂量为14mg / kg体重。载体组中的大鼠用等体积溶剂处理。实验2中的所有大鼠在SAH后24小时被杀死。在实验3中，将富集的小胶质细胞分成5组：对照，OxyHb，OxyHb +载体（DMSO），OxyHb +雷帕霉素和OxyHb + AZD8055。在小胶质细胞再接种后24小时，在新鲜培养基中分别用OxyHb（10μM），DMSO（体积等于雷帕霉素和AZD8055），雷帕霉素（2.74mM），AZD8055（0.8nM）处理细胞。在温育24小时（在37℃，5％CO 2中）后，除去细胞培养基，用PBS洗涤3次并用4％多聚甲醛固定。

[参考文献]

[1]. Chresta CM, et al. AZD8055 is a potent, selective, and orally bioavailable ATP-competitive mammalian target of rapamycin kinase inhibitor with in vitro and in vivo antitumor activity. Cancer Res, 2010, 70(1), 288-298.

[2]. You W, et al. Inhibition of mammalian target of rapamycin attenuates early brain injury through modulating microglial polarization after experimental subarachnoid hemorrhage in rats. J Neurol Sci. 2016 Aug 15;367:224-31.

[3]. Kawata T, et al. Dual inhibition of the mTORC1 and mTORC2 signaling pathways is a promising therapeutic target for adult T-cell leukemia. Cancer Sci. 2017 Oct 27.

[相关活性小分子]

AZD8055物理化学性质

[ 密度 ]:
1.2±0.1 g/cm3

[ 沸点 ]:
694.3±65.0 °C at 760 mmHg

[ 分子式 ]:
C₂₅H₃₁N₅O₄

[ 分子量 ]:
465.545

[ 闪点 ]:
373.7±34.3 °C

[ 精确质量 ]:
465.237610

[ PSA ]:
93.07000

[ LogP ]:
0.27

[ 蒸汽压 ]:
0.0±2.3 mmHg at 25°C

[ 折射率 ]:
1.609

[ 储存条件 ]:
-20°C

AZD8055安全信息

[ 安全声明 (欧洲) ]:
24/25