尼拉帕尼甲苯磺酸盐

Niraparib tosylate (MK-4827 tosylate) 是一种高效的 PARP1 和 PARP2 抑制剂,IC50 分别为 3.8 和 2.1 nM。

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信号通路 >> 表观遗传学 >> PARP

研究领域 >> 癌症

PARP-2:2.1 nM (IC50)

PARP-1:3.8 nM (IC50)

V-PARP:330 nM (IC50)

TANK-1:570 nM (IC50)

PARP-3:1300 nM (IC50)

在全细胞试验中,Niraparib(MK-4827)抑制PARP活性,EC50 = 4nM,EC90 = 45nM。 MK-4827用突变体BRCA-1和BRCA-2抑制癌细胞的增殖,CC50在10-100nM范围内。 MK-4827显示出优异的PARP1和2抑制,IC50分别为3.8和2.1nM,并且在全细胞试验中[1]。为了验证Niraparib(MK-4827)抑制这些细胞系中的PARP,用1μMNiraparib(MK-4827)处理A549和H1299细胞不同时间并使用化学发光测定法测量PARP酶活性。结果显示,Niraparib(MK-4827)在处理后15分钟内抑制PARP,在1小时时A549细胞抑制约85％,H1299细胞在1小时抑制约55％[2]。

Niraparib(MK-4827)具有良好的耐受性,并且在BRCA-1缺陷型癌症的异种移植模型中显示出作为单一药剂的功效。 Niraparib(MK-4827)在体内具有良好的耐受性,并且在BRCA-1缺陷型癌症的异种移植模型中显示出作为单一药剂的功效。 Niraparib(MK-4827)的特点是大鼠的药代动力学可接受,血浆清除率为28(mL/min)/ kg,分布容积非常高(Vdss = 6.9 L/kg),终末半衰期长(t1/2 = 3.4 h),和优异的生物利用度,F = 65％[1]。在两种情况下,Niraparib(MK-4827)均可增强p53突变Calu-6肿瘤的放射反应,每天两次给药的单剂量50 mg/kg比25 mg/kg更有效[3]。

使用HT Universal Chemiluminescent PARP Assay Kit在A549和H1299细胞中分析PARP的抑制。简言之，将细胞用DMSO或1μM镍吡啶（MK-4827）处理15,30,60或120分钟，胰蛋白酶消化，并转移至预冷管中。用冰冷的PBS洗涤细胞两次，并重悬于冷的PARP提取缓冲液中。将细胞悬浮液在冰上孵育30分钟，周期性涡旋以破坏细胞膜。离心悬浮液，将上清液转移到冰上预冷的管中。将96孔板的组蛋白包被孔用1X PARP缓冲液再水化，并在室温下孵育30分钟。除去PARP缓冲液，并将通过Bio-Rad蛋白质测定法测定的20μg蛋白质加入每个孔中，然后加入稀释的PARP-HSA酶和1X PARP缓冲液。然后将条带孔在室温下孵育60分钟，用含有0.1％Triton X-100的PBS洗涤两次，然后用PBS洗涤。将稀释的Strep-HRP加入到条带孔中并在室温下孵育60分钟。如前所述再次洗涤孔。将等体积的PeroxyGlow A和B组合并添加到孔中，并使用读板器立即获得化学发光读数[2]。

小鼠[3]将雌性裸鼠（Ncr Nu / Nu）随机分配到治疗组，每组由5至8只小鼠组成，当肿瘤直径增大至6.0mm时，此时开始用MK-4827治疗。 MK-4827以25mg / kg的剂量每日两次或50mg / kg每天一次给药21天或在肿瘤直径达到8mm的第9天停药。当肿瘤直径达到8.0mm（7.7-8.2mm）时，给予分次局部肿瘤照射（XRT）。使用由两个平行相对的137Cs源组成的小动物辐照器，每天一次连续14天或每天两次将辐射（每个部分2Gy）递送至小鼠的肿瘤腿部连续14天或连续7天，剂量率为5戈瑞/分钟。在照射期间，将未麻醉的小鼠机械固定在夹具中，使得肿瘤在3.0cm直径的辐射场内居中，并且动物的身体避免辐射暴露。在给予MK-4827和放射的那天，在当天的第一次辐射剂量之前1小时施用药物。

[1]. Jones P, et al. Discovery of 2-{4-[(3S)-piperidin-3-yl]phenyl}-2H-indazole-7-carboxamide (MK-4827): a novel oral poly(ADP-ribose)polymerase (PARP) inhibitor efficacious in BRCA-1 and -2 mutant tumors. J Med Chem. 2009 Nov 26;52(22):7170-85.

[2]. Bridges KA, et al. Niraparib (MK-4827), a novel poly(ADP-Ribose) polymerase inhibitor, radiosensitizes human lung and breast cancer cells. Oncotarget. 2014 Jul 15;5(13):5076-86.

[3]. Wang L, et al. MK-4827, a PARP-1/-2 inhibitor, strongly enhances response of human lung and breast cancer xenografts to radiation. Invest New Drugs. 2012 Dec;30(6):2113-20.

他拉唑帕利 | XAV-939 | 尼拉帕尼 | 维利帕尼 | 瑞卡帕布磷酸盐 | PJ34盐酸盐 | Pamiparib | Rucaparib Camsylate | E7449 | 4-[4-氟-3-[(4-甲氧基哌啶-1-基)羰基]苄基]酞嗪-1(2H)-酮 | G007-LK | 4-碘-3-硝基-苯甲酰胺 | 2-[1-(4,4-二氟环己基)-4-哌啶基]-6-氟-2,3-二氢-3-氧代-1H-异吲哚-4-甲酰胺 | 2-[2-氟-4-[(2S)-2-吡咯烷基]苯基]-1H-苯并咪唑-7-甲酰胺 | AG 14361