(4S)-6-(4-氯苯基)-N-乙基-8-甲氧基-1-甲基-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-A][1,4]苯并二氮杂卓-4-乙酰胺

GSK 525762A是 BET 溴结构域 抑制剂,IC50 为32.5-42.5 nM。

信号通路 >> 表观遗传学 >> 表观遗传读者域

研究领域 >> 癌症

IC50: 32.5-42.5 nM (BET)[1]

GSK 525762A(I-BET 762)显示出与BET的最高亲和力相互作用。 GSK 525762A以高亲和力结合BET的串联溴结构域(解离常数Kd为50.5-61.3nM)。 GSK 525762A以高效率(半最大抑制浓度IC50为32.5-42.5nM)取代了已经与BET的串联溴结构域预结合的四乙酰化H4肽[1]。 GSK 525762A对BRD2/3/4蛋白的BD1/BD2结构域具有高亲和力。 GSK 525762A处理可以减少所有三种蛋白质向染色质的募集[2]。 GSK 525762A抑制OPM-2细胞增殖,IC50为60.15 nM [3]。

在通过将OPM-2细胞注射到NOD-SCID小鼠中产生的体内全身异种移植模型中口服给予GSK 525762A(I-BET 762)的抗骨髓瘤活性。每隔一天给予高达10mg/kg和30mg/kg的GSK 525762A的每日口服剂量是良好耐受的,与载体对照相比对体重没有明显影响。用GSK 525762A治疗的小鼠血浆hLC浓度显着降低[3]。

将VCaP，LNCaP，22RV1，DU145和PC3前列腺癌细胞系以2000-10,000个细胞/孔（生长的最佳密度）接种在96孔板中，总体积为100μL含有10％FBS的培养基。 12小时后，将100μL培养基中的系列稀释化合物加入细胞中。 96小时后。孵育，通过Cell-Titer GLO评估细胞活力。将值归一化并使用GraphPad Prism软件计算IC 50。对于长期集落形成测定，将10,000-50,000个细胞/孔接种在六孔板中，并用100nM或500nM的JQ1或DMSO处理。 12天后，用甲醇固定细胞，用结晶紫染色并拍照。对于比色测定，将染色的孔用500μL10％乙酸处理，并使用分光光度计在560nm处测量吸光度[2]。

小鼠[3]在全身性异种移植骨髓瘤模型中测试口服施用GSK 525762A的抗骨髓瘤功效。为此目的，通过尾静脉注射给予107个OPM-2骨髓瘤细胞，对9至11周龄的经亚致死照射的（200cGy）NOD / SCID小鼠给予。在接种后第15天，动物开始用递增剂量的GSK 525762A或载体（1％甲基纤维素和0.2％十二烷基硫酸钠）口服治疗，持续至第83天。具体地，1组小鼠用载体治疗和4组不同的GSK 525762A给药方案：每天3 mg / kg;每天10毫克/千克;隔日30毫克/千克;每天30至20毫克/千克（即每天30毫克/千克，持续14天，然后是2周[第15至31天]停止治疗[由于体重下降直到动物体重恢复后停用药物] ]，每天20 mg / kg，直至实验终止[第43天至第82天]。在第15天口服施用GSK 525762A后0.5小时（开始治疗）取出血液样品（~70μL）;第27天，第45天和第82天（3,10和20至30 mg / kg仅每天一次）;和第83天（每隔一天30毫克/千克一次）。将血液离心以获得20μL血浆并在-20℃下储存，然后通过使用特定的液相色谱/质谱/质谱分析对GSK 525762A进行分析。

[1]. Nicodeme E, et al. Suppression of inflammation by a synthetic histone mimic. Nature. 2010 Dec 23;468(7327):1119-23.

[2]. Asangani IA, et al. Therapeutic targeting of BET bromodomain proteins in castration-resistant prostate cancer. Nature. 2014 Jun 12;510(7504):278-82.

[3]. Chaidos A, et al. Potent antimyeloma activity of the novel bromodomain inhibitors I-BET151 and I-BET762. Blood. 2014 Jan 30;123(5):697-705.

(+)-JQ1 | GSK126 | Tazemetostat (EPZ-6438) | 比拉瑞塞 | A-485 | 姜黄素 | ARV-771 | ARV-825 | BI 2536 | 1-异丙基-N-[(6-甲基-2-氧代-4-丙基-1,2-二氢-3-吡啶基)甲基]-6-[2-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-吡啶基]-1H-吲唑-4-甲酰胺 | C646 | 3-去氮腺嘌呤A | 7-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)-8-甲氧基-1-((R)-1-(吡啶-2-基)乙基)-1H-咪唑并[4,5-C]喹啉-2(3H)-酮 | 化合物3i(666-15) | CPI-637