鸦胆子苦醇

Brusatol,从 Brucea javanica 植物中分离的,可抑制 Nrf2。

信号通路 >> NF-κB信号通路 >> KEAP1-Nrf2

天然产物 >> 萜类化合物和糖苷

研究领域 >> 癌症

Nrf2[1]

Nrf2抑制剂如Brusatol的潜在治疗应用是在具有组成型高水平转录因子的细胞中Nrf2途径组分的下调。 Brusatol通过不依赖于Keap1和蛋白酶体和自噬蛋白质降解系统的机制引起Nrf2的消耗。 Brusatol通过转录后机制在小鼠Hepa-1c1c7肝细胞瘤细胞中引起Nrf2蛋白的快速和短暂消耗。 Brusatol还抑制新鲜分离的原代人肝细胞中的Nrf2 [1]。为了探索Brusatol(BR)与CDDP组合可能的协同细胞毒性,该研究使用MTT试验研究了Brusatol和CDDP共处理对CT-26细胞活力的影响。用不同浓度的Brusatol(0.05,0.15,0.45,1.35,4.05和12.15μg/ mL)和CDDP(0.05,0.15,0.45,1.35,4.05和12.15μg/ mL)处理CT-26细胞48小时,或者单独或组合使用。用Brusatol和CDDP处理48小时后,CT-26细胞的活力以剂量依赖性方式降低,IC50值分别为0.27±0.01和1.44±0.22μg/ mL。当Brusatol与CDDP以1：1的恒定浓度比组合时,与单药治疗相比,细胞生长抑制显着增强; Brusatol和CDDP共处理的IC50值为0.19±0.02μg/ mL [2]。

为了探索Brusatol在体内的抗癌作用,将在裸鼠中生长的A549异种移植物用作模型。向裸小鼠注射A549细胞以诱导肿瘤生长,然后单次ip注射2mg/kg Brusatol。在注射后24小时或48小时分离肿瘤。注射后24小时或48小时Nrf2蛋白水平显着降低,表明Brusatol能够到达肿瘤组织并抑制Nrf2通路。为了测量肿瘤生长,进行了两个不同的实验。在第一个实验中,一旦肿瘤大小达到平均230 mm3,DMSO,Brusatol(2 mg/kg),顺铂(2 mg/kg)或顺铂(2 mg/kg)和Brusatol(2 mg/kg)每隔一天腹腔注射联合治疗,共5次。单独的顺铂或Brusatol不显着抑制肿瘤生长,而在组合组中,肿瘤大小显着减少。在任何组中均未观察到显着的体重减轻[3]。

将对数生长的CT-26细胞以4×103细胞/孔的密度接种到96孔板上。在37°C温育24小时后，新鲜培养基含有一系列浓度的Brusatol（0.05,0.15,0.45,1.35,4.05和12.15μg/ mL）和CDDP（0.05,0.15,0.45,1.35,4.05和12.15μg）以100μL/孔加入/ mL）;每种浓度用于处理六个重复孔。在37℃温育48小时后，将细胞进一步与MTT（10mg / mL）在37℃温育4小时。然后除去上清液，用100μLDMSO溶解沉淀物。使用酶标仪在490nm的波长下测量吸光度。细胞毒性表示为抑制细胞生长50％的Brusatol和CDDP的浓度（IC 50值）。计算抑制率。通过将CT-26细胞单独或组合暴露于各种浓度的每种药剂48小时，研究了Brusatol与CDDP结合的可能的协同效应。使用CalcuSyn软件2.0 [2]评估协同效应。

使用小鼠[3]无胸腺裸鼠。给4-6周龄的小鼠注射A549细胞。一旦肿瘤达到80 mm3（两次五次顺铂治疗方案）或280 mm3（单次五次顺铂治疗方案），将小鼠随机分成四组，腹腔注射DMSO，顺铂（2 mg） / kg），Brusatol（2 mg / kg），或每隔一天组合一次，共5次。在最初的五次顺铂治疗方案后，治疗停止1周，使小鼠恢复，然后重复第二次五次顺铂治疗方案[3]。

[1]. Olayanju A, et al. Brusatol provokes a rapid and transient inhibition of Nrf2 signaling and sensitizes mammaliancells to chemical toxicity-implications for therapeutic targeting of Nrf2. Free Radic Biol Med. 2015 Jan;78:202-12.

[2]. Chen HM, et al. Synergistic antitumor effect of Brusatol combined with Cisplatin on colorectal cancer cells. Int J Mol Med. 2018 Mar;41(3):1447-1454.

[3]. Ren D, et al. Brusatol enhances the efficacy of chemotherapy by inhibiting the Nrf2-mediated defense mechanism. Proc Natl Acad Sci U S A. 2011 Jan 25;108(4):1433-8.

ML385 | 姜黄素 | 甲基巴多索隆 | 叔丁基对苯二酚(TBHQ) | 奥马索龙 | 4-辛基衣康酸 | CDDO-Im | NK-252 | 丹参素 | KI696 | CDDO-EA | (+)-DHMEQ | 桧木醇 | 芒果苷 | 落新妇苷