盐酸血根碱

Sanguinarine chloride 是一种来源于 Sanguinaria Canadensis 的生物碱,可通过激活活性氧 (ROS) 的产生来刺激细胞凋亡。Sanguinarine 诱导的细胞凋亡与 JNK 和 NF-κB 的活化有关。

信号通路 >> 细胞凋亡 >> 细胞凋亡

信号通路 >> 自噬 >> 自噬

天然产物 >> 生物碱

研究领域 >> 癌症

Apoptosis[1]

Sanguinarine(SANG)诱导的细胞凋亡与JNK和NF-κB信号通路的激活有关。为了确定Sanguinarine对细胞活力的影响,用不同浓度的Sanguinarine刺激22B-cFluc细胞24小时,然后用CKK刺激细胞凋亡。进行-8测定。 Sanguinarine治疗以剂量依赖性方式降低22B细胞的增殖。同时,测量用不同剂量的血根碱处理的22B-cFluc细胞的胞质提取物,以使用Ac-DEVD-pNA检测细胞半胱天冬酶-3活性,所述Ac-DEVD-pNA是经验证的半胱天冬酶-3底物。 450 nm处的吸光度以剂量依赖性方式增加,表明Sanguinarine刺激的caspase-3活性增加[1]。

为了评估Sanguinarine(SANG)在体内诱导的细胞凋亡,将22B-cFluc细胞皮下接种到裸鼠的一侧,并允许异种移植模型建立。用10mg/kg血根碱静脉内治疗小鼠。在处理后24,48和72小时,在用150mg/kg D-荧光素底物ip注射小鼠后进行生物发光成像。 Sanguinarine治疗早在初始治疗后48小时就会引起明显的发光信号增加。在整个实验过程中观察到持续的生物发光成像(BLI)强度增加。在处理后72小时,收集肿瘤并进行TUNEL染色以评估细胞凋亡。与对照肿瘤相比,Sanguinarine治疗组表现出明显更多的细胞凋亡,表明来自散发性凋亡细胞的绿色信号增加[1]。

使用胱天蛋白酶-3活性测定试剂盒测量胱天蛋白酶-3活性。简而言之，收集用不同浓度的血根碱（0.5μM，1μM，2μM，4μM）或对照DMSO处理的细胞，洗涤并在裂解缓冲液中在冰上裂解30分钟。然后通过以1,2000rpm离心10分钟收集上清液。向每个样品中加入Ac-DEVD-pNA（2mM）并在37℃下孵育1小时。最后使用分光光度计在405nm的波长下量化每个样品的光密度（OD）。 p-NA标准用于校准每个样品的caspase-3活性[1]。

使用细胞计数试剂盒-8通过CCK-8测定法测定血根碱的细胞活力。简而言之，将22B-cFluc细胞接种在96孔板（5×103细胞/孔）中，并用不同浓度的血根碱（0.5μM，1μM，2μM，4μM）处理24小时。然后向每个孔中加入10mL CKK-8，持续4小时，用酶标仪测量450nm处的吸光度。确定光密度（OD）值以反映来自每个孔的活细胞群[1]。

小鼠[1]通过将悬浮在PBS中的1×10 7个22B-cFluc细胞注射到裸鼠（n = 6）中来制备异种移植肿瘤模型。在肿瘤达到约100mm 3的体积后，将血根碱（10mg / kg）静脉内注射到小鼠中。注射24小时，48小时和72小时后，给小鼠单剂量150mg / kg D-荧光素，并使用Xenogen Lumina II系统进行生物发光成像。使用Living Image软件4.1表示感兴趣区域中的信号强度。对于抗肿瘤治疗研究，一组荷瘤小鼠（n = 6）在整个实验期间每隔一天静脉注射10mg / kg血根碱，而对照组小鼠（n = 6）仅接受DMSO 。计算肿瘤生长测量[1]。

[1]. Wang Y, Noninvasive bioluminescence imaging of the dynamics of sanguinarine induced apoptosis via activation of reactive oxygen species. Oncotarget. 2016 Apr 19;7(16):22355-67.

24-表芸苔素内酯 | 伊利司莫 | Adarotene | 杨梅素 | 白桦脂酸 | 牛磺鹅去氧胆酸 | 宝藿苷I | 木香烃内酯 | 20(S)-人参皂苷Rh2 | 白桦脂醇； 桦木醇 | 虎杖甙 | N1-(4-丁基-2-甲基苯基)乙酰胺 | 遍在蛋白异肽酶抑制剂I,G5 | 6-姜酚 | 甘氨鹅脱氧胆酸

MOLECULAR FORMULA :

C20-H14-N-O4.Cl

HEALTH HAZARD DATA

ACUTE TOXICITY DATA

TYPE OF TEST :

LD50 - Lethal dose, 50 percent kill

ROUTE OF EXPOSURE :

Oral

SPECIES OBSERVED :

Rodent - rat

DOSE/DURATION :

1658 mg/kg

TOXIC EFFECTS :

Behavioral - somnolence (general depressed activity) Behavioral - ataxia Gastrointestinal - hypermotility, diarrhea

REFERENCE :

JTEHD6 Journal of Toxicology and Environmental Health. (Hemisphere Pub., 1025 Vermont Ave., NW, Washington, DC 20005) V.1- 1975/76- Volume(issue)/page/year: 20,199,1987

TYPE OF TEST :

LDLo - Lowest published lethal dose

ROUTE OF EXPOSURE :

Intraperitoneal

SPECIES OBSERVED :

Rodent - rat

DOSE/DURATION :

20 mg/kg

TOXIC EFFECTS :

Details of toxic effects not reported other than lethal dose value

REFERENCE :

NATUAS Nature. (Nature Subscription Dept., POB 1018, Manasguan, NJ 08736) V.1- 1869- Volume(issue)/page/year: 162,265,1948

TYPE OF TEST :

LD50 - Lethal dose, 50 percent kill

ROUTE OF EXPOSURE :

Intravenous

SPECIES OBSERVED :

Rodent - rat

DOSE/DURATION :

29 mg/kg

TOXIC EFFECTS :

Behavioral - somnolence (general depressed activity) Behavioral - ataxia Gastrointestinal - hypermotility, diarrhea

REFERENCE :

JTEHD6 Journal of Toxicology and Environmental Health. (Hemisphere Pub., 1025 Vermont Ave., NW, Washington, DC 20005) V.1- 1975/76- Volume(issue)/page/year: 20,199,1987

TYPE OF TEST :

LD50 - Lethal dose, 50 percent kill

ROUTE OF EXPOSURE :

Subcutaneous

SPECIES OBSERVED :

Rodent - mouse

DOSE/DURATION :

102 mg/kg

TOXIC EFFECTS :

Details of toxic effects not reported other than lethal dose value

REFERENCE :

PLMEAA Planta Medica. (Georg Thieme Verlag, Postfach 732, D-7000 Stuttgart 1, Fed. Rep. Ger.) V.1- 1953- Volume(issue)/page/year: 43,161,1981

TYPE OF TEST :

LD50 - Lethal dose, 50 percent kill

ROUTE OF EXPOSURE :

Intravenous

SPECIES OBSERVED :

Rodent - mouse

DOSE/DURATION :

15900 ug/kg

TOXIC EFFECTS :

Details of toxic effects not reported other than lethal dose value

REFERENCE :

PLMEAA Planta Medica. (Georg Thieme Verlag, Postfach 732, D-7000 Stuttgart 1, Fed. Rep. Ger.) V.1- 1953- Volume(issue)/page/year: 43,161,1981 ** OTHER MULTIPLE DOSE TOXICITY DATA **

TYPE OF TEST :

TDLo - Lowest published toxic dose

ROUTE OF EXPOSURE :

Oral

SPECIES OBSERVED :

Rodent - rat

DOSE/DURATION :

73 mg/kg/1W-I

TOXIC EFFECTS :

Related to Chronic Data - death

REFERENCE :

NATUAS Nature. (Nature Subscription Dept., POB 1018, Manasguan, NJ 08736) V.1- 1869- Volume(issue)/page/year: 162,265,1948

TYPE OF TEST :

TDLo - Lowest published toxic dose

ROUTE OF EXPOSURE :

Oral

SPECIES OBSERVED :

Rodent - rat

DOSE/DURATION :

2700 ug/kg/2W-C

TOXIC EFFECTS :

Liver - changes in liver weight

REFERENCE :

JTEHD6 Journal of Toxicology and Environmental Health. (Hemisphere Pub., 1025 Vermont Ave., NW, Washington, DC 20005) V.1- 1975/76- Volume(issue)/page/year: 29,199,1987