SBE13

SBE13 是一种有效的,选择性的 Plk1 抑制剂,IC50 值为 200 pM,对 Plk2 (IC50>66 μM) 或 Plk3 (IC50=875 nM) 的作用较弱。

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研究领域 >> 癌症

PLK1:200 pM (IC50)

PLK3:875 nM (IC50)

SBE13显着降低细胞增殖并诱导HeLa细胞凋亡,EC50为18μM[1]。 SBE13(1-100μM)对NIH-3T3细胞中的胱天蛋白酶3/7活性没有影响。 SBE13(66和100μM)在处理原代细胞后不改变形态。 SBE13(10和100μM)可减少原代细胞中的pRb染色,这表明G0/G1停滞[2]。 SBE13(66和100μM)增加细胞周期蛋白B1,磷酸化组蛋白H3,Wee1,Emi1和securin的水平,并导致HeLa细胞中Cdc27的切割。 SBE13(10和100μM)也诱导HeLa细胞凋亡[3]。

为了测定Plk1激酶活性，在双胸苷阻断后，在SBE13存在下释放13小时后裂解细胞，并使用抗体从裂解物中免疫沉淀激酶。简而言之，对于每次免疫沉淀，将800μg总蛋白与Plk1抗体混合物（1.5μg）在4℃下在旋转器上孵育2小时。使用蛋白A / G琼脂糖珠收集免疫沉淀的蛋白质。将Plk1免疫沉淀物与酪蛋白（1μg）和[γ-32P] ATP（1μCi）在37℃下在激酶缓冲液中孵育30分钟。来自激酶测定的产物在10％双 - 三 - 聚丙烯酰胺凝胶上分级，并且在暴露12-36小时后通过放射自显影观察磷酸化的底物。将等量的免疫沉淀物进行Western印迹分析以确认Plk1蛋白在激酶反应中的相等负载[1]。

[1]. Keppner S, et al. Identification and validation of a potent type II inhibitor of inactive polo-like kinase 1. ChemMedChem. 2009 Nov;4(11):1806-9.

[2]. Keppner S, et al. Fate of primary cells at the G?/S boundary after polo-like kinase 1 inhibition by SBE13. Cell Cycle. 2011 Feb 15;10(4):708-20. Epub 2011 Feb 15.

[3]. Keppner S, et al. Biological impact of freezing Plk1 in its inactive conformation in cancer cells. Cell Cycle. 2010 Feb 15;9(4):761-73. Epub 2010 Feb 16.

伏拉塞替 | BI 2536 | Centrinone | 瑞格色替钠 | CFI-400945自由基 | GSK-461364 | 3-[2-(三氟甲基)苄氧基]-5-(5,6-二甲氧基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)-2-噻吩甲酰胺 | TAK-960 | NMS-1286937 | Poloxin | (2Z)-2-氰基-N-(2,5-二溴苯基)-3-羟基-2-丁烯酰胺 | Ro3280 | 2-[[5-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-甲基-3-吡啶基]氨基]-5,7-二氢-9-(三氟甲基)- 6H-嘧啶并[5,4-D][1]苯并氮杂卓-6-硫酮 | N-[[4-[(6-氯-3-吡啶基)甲氧基]-3-甲氧基苯基]甲基]-3,4-二甲氧基苯乙胺盐酸盐 | (E)-4-[2-[2-[N-乙酰基-N-[(4-甲氧基苯基)磺酰]氨基]苯基]乙烯基]吡啶 1-氧化物