Litronesib

Litronesib 是一种选择性的 Eg5 抑制剂,具有抗肿瘤的活性。

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研究领域 >> 癌症

Eg5

Litronesib(LY2523355)是一种选择性Eg5抑制剂。 Litronesib(25 nM)在有丝分裂停滞期间诱导癌细胞死亡,这需要持续激活纺锤体组装检查点(SAC)[1]。

Litronesib(LY2523355; 1.1,3.3,10和30mg/kg,iv)以剂量依赖性显示抗肿瘤活性,并导致癌细胞在Colo205异种移植肿瘤中显着增加组蛋白H3磷酸化的免疫阳性[1]。

将癌细胞接种在聚-d-赖氨酸包被的96孔板中并孵育过夜。然后用指定浓度的Litronesib处理细胞不同的时间段。然后将细胞用含3.7％甲醛的PBS溶液固定45分钟或1×Prefer固定液30分钟，室温固定，用冷甲醇透化10分钟，然后用PBS中的0.2％Triton X-100固定10分钟。用PBS洗涤细胞三次。然后将细胞与100μg/ mL无DNA酶的RNase和10μg/ mL碘化丙啶一起孵育1小时，并基于DNA缩合扫描有丝分裂指数（MI）测量值，作为具有浓缩DNA的细胞的百分比。对于基于组蛋白H3磷酸化或细胞凋亡分析的MI，将细胞在4℃下与抗磷酸化组蛋白H3抗体或抗磷酸化组蛋白H2AX以1：1,000稀释度用PBS中的5％牛血清白蛋白（BSA）孵育过夜。 ， 分别。用PBS中的0.2％Triton-X 100洗涤细胞三次，并与Alexa 488二抗（在PBS-2％BSA中1：1,000）在室温下孵育60分钟。用PBS再次洗涤细胞三次，并在含有10μg/ mL碘化丙啶和100μg/ mL RNaseA的PBS中染色15分钟。用Acumen Explorer eX3微孔板细胞计数器扫描染色的细胞。结果表示为磷酸 - 组蛋白H3-Ser10或磷酸 - 组蛋白H2AX阳性细胞的百分比[1]。

建立原代人肿瘤异种移植模型并在裸鼠中维持。通过连续测径器测量，将来自已建立的癌细胞系或人肿瘤外植体片段的每个处理组10只小鼠的皮下异种移植肿瘤小鼠的抗肿瘤效力评估为肿瘤体积并计算。 p388同系肿瘤模型用于使用体重20至23g的雌性BDF1小鼠进行高含量成像分析，其在用于实验之前在内部适应一周。 p388鼠淋巴细胞白血病细胞通过STR测定鉴定并保持在含有10％FBS的RPMI1640培养基中。接种时，用无血清培养基洗涤细胞三次，通过腹膜内注射将125万个细胞植入小鼠体内。在植入后第5天，通过静脉推注或以适当剂量和持续时间静脉内输注，用Litronesib治疗小鼠。对小鼠实施安乐死并绘制含有p388肿瘤细胞的腹水（腹膜内）液，并通过灵敏，流式细胞术和磷酸化组蛋白H3，G2-M和细胞凋亡的TUNEL测定进行分析。对于药代动力学研究，通过心脏穿刺收集血样并用EDTA产生血浆并确定Litronesib在血浆中的暴露[1]。

[1]. Ye XS, et al. A Novel Eg5 Inhibitor (LY2523355) Causes Mitotic Arrest and Apoptosis in Cancer Cells and Shows Potent Antitumor Activity in Xenograft Tumor Models. Mol Cancer Ther. 2015 Nov;14(11):2463-72.

(2S)-2-(3-氨基丙基)-5-(2,5-二氟苯基)-N-甲氧基-N-甲基-2-苯基-1,3,4-噻二唑-3(2H)-甲酰胺 | GSK-923295 | 伊斯平斯 | Kif15-IN-1 | 星素 | Kif15-IN-2 | CW-069 | K858外消旋 | SB 743921 | AZ82 | Eg5抑制剂V,trans-24 | EMD534085 | Paprotrain | Litronesib Racemate