帕西替尼(SB1518)

帕西替尼(SB1518)用途

Pacritinib 是一种有效的野生型 JAK2 和 JAK2^V617F 突变型抑制剂，IC₅₀ 分别为 23 nM 和 19 nM。Pacritinib 也抑制 FLT3及其突变型FLT3^D835Y，IC₅₀ 分别为 22 nM 和 6 nM。

帕西替尼(SB1518)名称

[ CAS 号 ]:
937272-79-2

[ 中文名 ]:
Pacritinib

[ 英文名 ]:
Pacritinib

[英文别名 ]:

SB1518
Pacritinib

帕西替尼(SB1518)生物活性

[ 描述 ]:

Pacritinib 是一种有效的野生型 JAK2 和 JAK2V617F 突变型抑制剂,IC50 分别为 23 nM 和 19 nM。Pacritinib 也抑制 FLT3 及其突变型 FLT3D835Y,IC50 分别为 22 nM 和 6 nM。

[ 相关类别 ]:

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> FLT3

信号通路 >> 表观遗传学 >> JAK

信号通路 >> JAK/STAT信号通路 >> JAK

信号通路 >> 干细胞及 Wnt 通路 >> JAK

研究领域 >> 癌症

[ 靶点 ]

JAK2V617F:19 nM (IC50)

JAK2wt:23 nM (IC50)

Tyk2:50 nM (IC50)

JAK3:520 nM (IC50)

JAK1:1280 nM (IC50)

FLT3D835Y:6 nM (IC50)

FLT3wt:22 nM (IC50)

[体外研究]

相对于JAK2,Pacritinib(SB1518)对TYK2的效力低两倍(IC50 = 50 nM),对JAK3的效力低23倍(IC50 = 520 nM),对JAK1的效力低56倍(IC50 = 1280 nM) 。当对照100nM Pacritinib在相当于其米氏常数(Km)的三磷酸腺苷浓度下测试时,其余评价的激酶显示<30％的抑制。 Pacritinib抑制MV4-11和MOLM-13细胞(两者都是源自由FLT3 ITD突变驱动的人急性髓性白血病的细胞系),IC50分别为47和67nM。 Pacritinib抑制Karpas 1106P和Ba/F3-JAK2V617F细胞(它们是依赖于JAK2信号传导的细胞系),IC50分别为348和160 nM [1]。将含有MV4-11细胞的FLT3-ITD用不同浓度的Pacritinib(SB1518)和pFLT3处理3小时,定量pSTAT5和pERK1/2水平。 Pacritinib导致pFLT3,pSTAT5,pERK1/2和pAkt的剂量依赖性降低,IC50分别为80,40,33和29nM。与MV4-11和MOLM-13细胞中的FLT3-ITD相比,RS4; 11中FLT3-wt的自磷酸化IC50高4倍(IC50 = 600nM)。然而,在低得多的Pacritinib浓度下检测到STAT5抑制作用(IC50 = 8 nM)[2]。

[体内研究]

为了评估Ba/F3-JAK2V617F植入模型中的功效,用Pacritinib(SB1518)以50或150mg/kg poqd的剂量处理小鼠13天,在细胞接种后4天开始药物给药。在研究终止时,载体对照小鼠表现出脾肿大和肝肿大(分别为~7和1.3倍),使人联想到症状性骨髓纤维化患者的症状。 150 mg/kg poqd的SB1518治疗显着改善所有这些症状,脾脏重量正常化60％(±9％),肝脏重量正常化92％(±5％),耐受性良好,没有明显的体重减轻或任何血液学毒性,包括血小板减少和贫血[1]。在大鼠中,Pacritinib(SB1518)显示出适度快速吸收(tmax = 4 h),峰值浓度为114 ng/mL,AUC为599 ng•h/mL,单次终末半衰期为6 h口服剂量为10毫克/千克。在犬中,Pacritinib(SB1518)被迅速吸收(tmax = 2.0 h),峰值浓度为~12 ng/mL,AUC为53 ng•h/mL,单次口服后终末半衰期为3.4 h剂量为3毫克/千克[3]。

[激酶实验]

所有测定均在384孔白色微量滴定板中进行。化合物（例如，Pacritinib）从10μM开始以8个步骤连续稀释4倍。反应混合物由25μL测定缓冲液（50mM HEPES pH 7.5,10mM MgCl 2,5mM MnCl 2,1mM DTT，0.1mM Na 3 VO4,5mMβ-甘油磷酸盐）组成。对于FLT3测定，该反应含有2.0μg/ mL FLT3酶，5μM聚（Glu，Tyr）底物和4μMATP。对于JAK1测定，该反应含有2.5μg/ mL的JAK1酶，10μM的聚（Glu，Ala，Tyr）底物和1.0μM的ATP。对于JAK2测定，该反应含有0.35μg/ mL的JAK2酶，10μM的聚（Glu，Ala，Tyr）底物和0.15μM的ATP。对于JAK3测定，该反应含有3.5μg/ mL的JAK3酶，10μM的聚（Glu，Ala，Tyr）底物和6.0μM的ATP。对于TYK2测定，该反应含有2.5μg/ mL的TYK2酶，10μM的聚（Glu，Ala，Tyr）底物和0.15μM的ATP。将反应物在室温下温育2小时，然后加入13μLPKLight检测试剂。孵育10分钟后，在多标签平板读数器上读取发光信号[1]。

[细胞实验]

使用SET-2和Karpas 1106P细胞，以及Ba / F3-JAK2V617F-GFP-Luc细胞。对于96孔板中的增殖测定，将细胞以30-50％汇合接种，并在第二天用化合物（例如，Pacritinib）（一式三份）以高达10μM的浓度处理48小时。使用CellTiter-Glo测定监测细胞活力。绘制剂量 - 反应曲线以使用XL-fit软件确定化合物的IC 50值[1]。

[动物实验]

小鼠[1]使用12周龄的雌性无胸腺BALB / c裸鼠（BALB / cOlaHsd-Foxn1nu）;使用9-10周龄的雌性SCID米色小鼠（CB17.Cg-PrkdcscidLystbg / Crl）。对于SET-2白血病模型，在严重联合免疫缺陷的米色小鼠的右侧皮下注射5×106个肿瘤细胞。将细胞重悬于50μL无血清生长培养基中，与Matrigel 1：1混合，并以100μL的总体积注射。通过卡尺测量确定肿瘤体积，并且当肿瘤达到280mm 3的平均体积（肿瘤体积（mm 3）=（w 2×1）/ 2）31天后开始药物治疗。该研究使用每组12只小鼠进行，并且在第18天给药后3小时处死动物。计算肿瘤生长抑制。对于功效研究，通过口服强饲法（10mL / kg体重）治疗小鼠，剂量为50至150mg / kg SB1518。大鼠和狗[3]在该研究中使用雄性Wistar大鼠（6-8周龄，体重270至325g）和雄性Beagle犬（6-7个月大，体重9-11kg）。狗和大鼠的口服剂量分别为3和10mg / kg。通过管饲法将剂量作为悬浮液（0.5％甲基纤维素和0.1％吐温80）给予大鼠，并作为明胶胶囊给予狗。在口服给药后，在含有K3EDTA作为抗凝剂的管中的不同时间点（0至24小时）收集连续血液样品（狗的颈静脉和大鼠的上腔静脉），并离心，分离血浆并储存于 - 70℃直至分析。通过LC / MS / MS处理和分析血浆样品。使用WinNonlin通过非房室方法估计药代动力学参数。

[参考文献]

[1]. Hart S, et al. SB1518, a novel macrocyclic pyrimidine-based JAK2 inhibitor for the treatment of myeloid and lymphoid malignancies. Leukemia. 2011 Nov;25(11):1751-9.

[2]. Hart S, et al. Pacritinib (SB1518), a JAK2/FLT3 inhibitor for the treatment of acute myeloid leukemia. Blood Cancer J. 2011 Nov;1(11):e44.

[3]. William AD, et al. Discovery of the macrocycle 11-(2-pyrrolidin-1-yl-ethoxy)-14,19-dioxa-5,7,26-triaza-tetracyclo[19.3.1.1(2,6).1(8,12)]heptacosa-1(25),2(26),3,5,8,10,12(27),16,21,23-decaene (SB1518), a potent Janus kinase 2/fms-like tyrosine kinase-3 (JA

[相关活性小分子]

帕西替尼(SB1518)物理化学性质

[ 密度 ]:
1.2±0.1 g/cm3

[ 沸点 ]:
711.4±70.0 °C at 760 mmHg

[ 分子式 ]:
C₂₈H₃₂N₄O₃

[ 分子量 ]:
472.579

[ 闪点 ]:
384.0±35.7 °C

[ 精确质量 ]:
472.247437

[ PSA ]:
68.74000

[ LogP ]:
4.23

[ 外观性状 ]:
粉末

[ 蒸汽压 ]:
0.0±2.3 mmHg at 25°C

[ 折射率 ]:
1.574

[ 储存条件 ]:
-20℃

帕西替尼(SB1518)相关知识

Pacritinib(SB1518)_生物活性和实验方法

2018-10-20 21:55:59

Pacritinib 是一种有效的野生型 JAK2 和 JAK2V617F 突变型抑制剂，IC50 分别为 23 nM 和 19 nM。Pacritinib 也抑制 FLT3及其突变型FLT3D835Y，IC50 分别为 22 nM 和 6 nM。一、Pacritinib的生物活性：1）体外活性相...