FIPI

FIPI 是 halopemide 的衍生物,能够有效抑制 PLD1 和 PLD2,IC50 值分别为 25 nM 和 20 nM。

信号通路 >> 自噬 >> 自噬

信号通路 >> 代谢酶/蛋白酶 >> 磷脂

研究领域 >> 炎症/免疫

IC50: 25 nM (PLD1), 20 nM (PLD2)

尽管高清除率大于2 L/h/kg,但FIPI显示半衰期大于5小时,Cmax大于50倍于PLD2的50倍,中等生物利用度为18％[1]。 FIPI以剂量依赖性方式抑制PLD1和PLD2,在约25nM时观察到50％的活性丧失。 FIPI不是一种不可逆的自杀抑制剂,但它也不会在去除药物后迅速完全逆转。 IPI不会改变PLD亚细胞定位,PIP2,肌动蛋白应力纤维或上游信号传导事件。 FIPI挽救了PLD2抑制的膜皱褶和细胞扩散[2]。 FIPI以剂量依赖的方式减弱硫柳汞诱导的PLD活化,以及Hg诱导的MAEC中PLD活化,以及MAECs中剂量依赖性激动剂和氧化剂诱导的PLD活化[3]。

使用我们建立的测量[32P] - 放射性标记的PBt的形成的方法来定量磷脂酶D活性。提取细胞脂质，并使用我们公开的脂质提取和薄层色谱分离方法分离PBt。使用液体闪烁计数测量放射性，并将DPM定量归一化至总细胞脂质提取物中的106个计数或作为对照的百分比（媒介物处理的细胞）。

通过使用商业MTT还原测定试剂盒测定完整细胞中MTT降低的程度来确定MAEC中的细胞毒性。在实验处理结束时，加入MTT溶液（10％vol / vol，在MEM中），将细胞温育3小时，然后加入MTT溶剂，其量等于原始培养物体积。根据制造商的建议，通过分光光度法测定降低的MTT的吸光度。

[1]. Monovich L, et al. Optimization of halopemide for phospholipase D2 inhibition. Bioorg Med Chem Lett. 2007 Apr 15;17(8):2310-1.

[2]. Su W, et al. 5-Fluoro-2-indolyl des-chlorohalopemide (FIPI), a phospholipase D pharmacological inhibitor that alters cell spreading and inhibits chemotaxis. Mol Pharmacol. 2009 Mar;75(3):437-46.

[3]. Secor JD, et al. Novel lipid-soluble thiol-redox antioxidant and heavy metal chelator, N,N'-bis(2-mercaptoethyl)isophthalamide (NBMI) and phospholipase D-specific inhibitor, 5-fluoro-2-indolyl des-chlorohalopemide (FIPI) attenuate mercury-induced lipid si

U型73122 | D609 钾盐 | 达普拉缔 | 喹吖因二盐酸 | 蜂毒肽 | 伐瑞拉迪 | CAY10650 | AA26-9 | ML348 | 丹参酮I | MAFP | ML349 | 1-单壬烷-rac-甘油 | Lp-PLA2-IN-1 | 二硫代碳酸 rel-(-)-O-[(3aR,4R,5S,7R,7aR)-八氢-4,7-甲桥-1H-茚-5-基]酯钾盐