1454619-14-7

• 常用中文名：PU-WS13
• 常用英文名：PU-WS13
• CAS号：1454619-14-7
• 分子式：C₁₇H₂₀Cl₂N₆S
• 分子量：411.352
• 相关类别： 信号通路 细胞周期/DNA损伤 HSP
• 发布时间：2016-05-16 13:12:29
• 更新时间：2024-02-07 22:08:08
• PU-WS13 是一种选择性的 Grp94 抑制剂,EC50 值为 0.22 μM。

名称

• 中文名: PU-WS13
• 英文名: pu-ws13
• 中文别名: 8-(3,5-二氯苯基硫代)-9-(3-(异丙基氨基)丙基)-9H-嘌呤-6-胺
• 英文别名: 8-(3,5-dichlorophenylthio)-9-(3-(isopropylamino)propyl)-9H-purin-6-amine; 9H-Purine-9-propanamine, 6-amino-8-[(3,5-dichlorophenyl)thio]-N-(1-methylethyl)-; 8-((3,5-Dichlorophenyl)thio)-9-(3-(isopropylamino)propyl)-9H-purin-6-amine; 8-[(3,5-Dichlorophenyl)sulfanyl]-9-[3-(isopropylamino)propyl]-9H-purin-6-amine

物化性质

• 密度: 1.5±0.1 g/cm3
• 沸点: 617.4±65.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₁₇H₂₀Cl₂N₆S
• 分子量: 411.352
• 闪点: 327.2±34.3 °C
• 精确质量: 410.084717
• PSA: 106.95000
• LogP: 4.00
• 外观性状: 白色固体
• 蒸汽压: 0.0±1.8 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.703
• 储存条件: -20 ̊C
• 水溶解性: 微溶于水，溶于DMSO

生物活性

• 描述: PU-WS13 是一种选择性的 Grp94 抑制剂,EC50 值为 0.22 μM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> HSP
  信号通路 >> 代谢酶/蛋白酶 >> HSP
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  GRP94:0.22 μM (EC50)

  HSP90α:27.3 μM (EC50)

  HSP90β:41.8 μM (EC50)

  TRAP-1:7.3 μM (EC50)

• 体外研究: PU-WS13是Grp94抑制剂,EC50为0.22μM。 PU-WS13还略微抑制Hsp90α,Hsp90β和Trap-1,EC50分别为27.3,41.8和7.3μM。 PU-WS13(2.5-20μM)对两种非恶性细胞系没有毒性。 PU-WS13(15μM)破坏了通过Grp94介导的SKBr3细胞质膜上HER2的环状结构。 PU-WS13抑制Grp94,并且该抑制诱导HER2过表达乳腺癌细胞的凋亡并降低其活力[1]。
• 激酶实验: Hsp90 FP竞争测定在黑色96孔微板中进行，每孔的总体积为100μL。在DMSO中制备10μMcy3B-GM和PU-FITC3的原液，并用Felts缓冲液（20mM Hepes（K），pH7.3,50mM KCl，2mM DTT，5mM MgCl2,20mM Na2MoO4和0.01％稀释）。 NP40含0.1 mg / mL BGG）。向每个孔中加入荧光染料标记的Hsp90配体（6nM cy3B-GM用于Hsp90α，Hsp90β和Grp94和3nM PU-FITC3用于Trap-1），蛋白质（10nMHsp90α，10nMHsp90β，10nM Grp94， 30nM Trap-1）和测试的抑制剂（包括PU-WS13，DMSO中的初始原液），终体积为100μLFelts缓冲液。化合物一式两份或一式三份加入。对于每个测定，在每个测定板上包括背景孔（仅缓冲液），示踪物对照（仅游离的，荧光染料标记的Hsp90配体）和结合的对照（在蛋白质存在下的荧光染料标记的Hsp90配体）。将测定板在振荡器上于4℃温育24小时，并测量FP值（以mP计）。与Hsp90结合的荧光染料标记的Hsp90配体的分数与mP值相关并且相对于竞争剂浓度的值作图。通过拟合数据获得50％结合的荧光染料标记的Hsp90配体被置换的抑制剂浓度。对于cy3B-GM，使用530nm的激发滤光器和580nm的发射滤光器，其具有561nm的二向色镜。对于PU-FITC3，使用485nm的激发滤光器和530nm的发射滤光器，其具有505nm的二向色镜。分析所有实验数据，并给出结合亲和力值作为相对结合亲和力值（EC50，50％荧光配体被化合物竞争的浓度）[1]。
• 细胞实验: 用抑制剂（包括PU-WS13）处理细胞72小时或用Grp94 siRNA或对照siRNA转染细胞，并使用CellTiter-Glo发光细胞存活力测定评估它们的存活力。该方法基于存在的ATP的量化来确定培养物中存活细胞的数量，其表明存在代谢活性细胞[1]。
• 参考文献:

  [1]. Patel PD, et al. Paralog-selective Hsp90 inhibitors define tumor-specific regulation of HER2. Nat Chem Biol. 2013 Nov;9(11):677-684.