1610536-69-0

• 常用中文名：JNJ-47117096盐酸盐
• 常用英文名：JNJ-47117096 hydrochloride
• CAS号：1610536-69-0
• 分子式：C₂₁H₂₃ClN₄O₂
• 分子量：398.886
• 相关类别： 信号通路 PI3K/Akt/mTOR 信号通路 MELK
• 发布时间：2018-05-26 23:45:49
• 更新时间：2024-01-09 12:23:01
• JNJ-47117096 hydrochloride 是一种有效的，选择性的 MELK 抑制剂，IC₅₀ 值为 23 nM；同时对 Flt3 的作用较强，IC₅₀ 值为 18 nM。

名称

• 中文名: JNJ-47117096盐酸盐
• 英文名: JNJ-47117096 hydrochloride
• 英文别名: Benzamide, 2-methoxy-4-(1H-pyrazol-4-yl)-N-(2,3,4,5-tetrahydro-1H-3-benzazepin-7-yl)-, hydrochloride (1:1); 2-Methoxy-4-(1H-pyrazol-4-yl)-N-(2,3,4,5-tetrahydro-1H-3-benzazepin-7-yl)benzamide hydrochloride (1:1)

物化性质

• 分子式: C₂₁H₂₃ClN₄O₂
• 分子量: 398.886
• 精确质量: 398.150940
• 储存条件: 2-8℃

生物活性

• 描述: JNJ-47117096 hydrochloride 是一种有效的,选择性的 MELK 抑制剂,IC50 值为 23 nM；同时对 Flt3 的作用较强,IC50 值为 18 nM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> FLT3
  信号通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信号通路 >> MELK
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  IC50: 23 nM (MELK), 18 nM (Flt3)[1]

• 体外研究: JNJ-47117096盐酸盐是一种有效的选择性MELK抑制剂,IC50为23 nM,也有效抑制Flt3,IC50为18 nM,可轻度阻断CAMKIIδ,Mnk2,CAMKIIγ和MLCK(IC50,810 nM,760 nM, 1000nM,1000nM)。 JNJ-47117096(MELK-T1)抑制Flt3驱动的Ba/F3细胞系的增殖,在不存在IL-3的情况下IC50为1.5μM,而在IL-3存在下未观察到抑制活性。在存在或不存在IL-3的情况下,JNJ-47117096不抑制用FGFR1,FGFR3或KDR转染的Ba/F3细胞系的增殖[1]。 JNJ-47117096(MELK-T1,10μM)延迟MCF-7细胞通过S期的进展。 JNJ-47117096抑制MELK,然后施加停滞的复制叉和DNA双链断裂(DSB)。 JNJ-47117096激活ATM介导的DNA损伤反应(DDR)。 JNJ-47117096(3,10μM)导致生长停滞和衰老表型。此外,JNJ-47117096诱导p53的强磷酸化,p21的长期上调和FOXM1靶基因的下调[2]。
• 激酶实验: 使用放射性过滤器结合测定法测量MELK激酶活性的抑制。简而言之，每个测定孔在30μL反应缓冲液（25mM Tris）中含有1.25nM MELK（人，残基1-340）10μMATP，6.7μCi/mLγ33P-ATP，3μM生物素化ZIP-tide肽（生物素-KKLNRTLSFAEPG）。 pH7.5,10mM MgCl 2,1mM DTT，1mM EGTA，0.1％Triton X100）。激酶反应在室温下进行25分钟，然后用40μL2％正磷酸终止。通过MAPH滤板过滤反应除去未结合的放射性。然后将捕获的33P标记的肽用200μL0.5％正磷酸洗涤两次，每孔加入20μLMicroscint-20，并使用Topcount通过闪烁计数测定放射性的量。为了计算化合物IC50，使用半对数序列稀释液一式两份产生8点剂量 - 反应曲线。然后使用GraphPad Prism 5.0 [1]中的四参数逻辑拟合方法导出IC 50值。
• 细胞实验: 将溶解在DMSO中的化合物（JNJ-47117096）喷雾到384孔板（100nL /孔）中。加入Ba / F3-Flt3细胞悬浮液（20,000细胞/孔），然后加入10ng / mL IL3。将细胞在37℃和5％CO 2下孵育24小时。加入Alamar Blue溶液，并在37℃温育4小时后，在荧光板读数器（540nm激发和590nm发射）上测量荧光强度。在不存在IL3的情况下的对照实验以相同的方式进行。为了计算化合物IC50，使用半对数序列稀释液一式两份产生8点剂量 - 反应曲线。通过最小平方和方法将最佳拟合曲线拟合到％对照与化合物浓度的关系图中。由此计算出IC50值[1]。
• 参考文献:

  [1]. Johnson CN, et al. Fragment-based discovery of type I inhibitors of maternal embryonic leucine zipper kinase. ACS Med Chem Lett. 2014 May 23;6(1):25-30.

  [2]. Beke L, et al. MELK-T1, a small-molecule inhibitor of protein kinase MELK, decreases DNA-damage tolerance in proliferating cancer cells. Biosci Rep. 2015 Oct 2;35(6). pii: e00267.