1380288-87-8

• 常用中文名：匹诺司他
• 常用英文名：Pinometostat (EPZ5676)
• CAS号：1380288-87-8
• 分子式：C₃₀H₄₂N₈O₃
• 分子量：562.706
• 相关类别： 生物化工 抑制剂 表观遗传学(Epigenetics) Histone Methyltransferase 抑制剂
• 发布时间：2018-06-30 15:43:23
• 更新时间：2024-01-02 12:17:42
• EPZ-5676 是一种高效的，具有选择性的 DOT1L histone methyltransferase 抑制剂，K_i 值 < 80 pM，比对其它多种 PMTs 的抑制性高 37000 倍。

名称

• 中文名: 匹诺司他
• 英文名: (2R,3R,4S,5R)-2-(6-aminopurin-9-yl)-5-[[[3-[2-(6-tert-butyl-1H-benzimidazol-2-yl)ethyl]cyclobutyl]-propan-2-ylamino]methyl]oxolane-3,4-diol
• 英文别名: Pinometostat; 5'-[{cis-3-[2-(5-Tert-Butyl-1h-Benzimidazol-2-Yl)ethyl]cyclobutyl}(Propan-2-Yl)amino]-5'-Deoxyadenosine; EPZ-5676; UNII-8V9YR09EF3; Adenosine, 5'-deoxy-5'-[[cis-3-[2-[5-(1,1-dimethylethyl)-1H-benzimidazol-2-yl]ethyl]cyclobutyl](1-methylethyl)amino]-; EP6; CS-1419; EPZ-5676||EPZ 5676; 5'-Deoxy-5'-[isopropyl(cis-3-{2-[5-(2-methyl-2-propanyl)-1H-benzimidazol-2-yl]ethyl}cyclobutyl)amino]adenosine; S7062; EPZ5676

物化性质

• 密度: 1.5±0.1 g/cm3
• 沸点: 835.3±75.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₃₀H₄₂N₈O₃
• 分子量: 562.706
• 闪点: 459.0±37.1 °C
• 精确质量: 562.338013
• PSA: 151.23000
• LogP: 4.80
• 外观性状: 白色至类白色粉末
• 蒸汽压: 0.0±3.2 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.722
• 储存条件: -20℃

生物活性

• 描述: Pinometostat (EPZ-5676) 是有效的DOT1L组蛋白甲基转移酶抑制剂, Ki 为 80 pM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 表观遗传学 >> 组蛋白甲基转移酶
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  Ki: < 80 pM (DOT1L histone methyltransferase)

• 体外研究: Pinometostat(EPZ-5676)抑制H3K79me2,MV4-11和HL60细胞的IC50值分别为3 nM和5 nM。 Pinometostat(EPZ-5676)是一种有效的MV4-11增殖抑制剂,IC50值为3.5 nM [1]。 Pinometostat(EPZ-5676)诱导协同和持久的抗增殖作用,增加分化标志物的表达和作为单剂的凋亡,并证明与MLL-r细胞中的AML标准护理药物组合的组合益处[2]。
• 体内研究: Pinometostat(EPZ-5676)(70mg/kg,ip)在MLL重排白血病的大鼠异种移植模型中引起完全和持续的消退。 Pinometostat(EPZ-5676)(70,35 mg/kg,iv)可降低大鼠肿瘤的HOXA9和MEIS1 mRNA水平,并降低体内MLL-融合靶基因的表达[1]。
• 细胞实验: 为了分析在Pinometostat处理后MV4-11细胞中组蛋白甲基化的抑制，在变性条件下用Tris-甘氨酸SDS运行缓冲液在10-20％Tris HCl凝胶上分级分离提取的组蛋白（400ng）并转移到硝酸纤维素滤膜上。将滤器切成条并在室温（RT）下在封闭缓冲液中温育1小时，然后在4℃下在封闭缓冲液中温育过夜。用洗涤缓冲液（含有0.01％吐温20（PBST）的磷酸盐缓冲盐水（PBS））将滤膜洗涤3次，每次5分钟，并在室温下用红外标记的第二抗体温育1小时。将滤膜在PBST中洗涤并在室温下用适当的总组蛋白抗体对照（小鼠抗组蛋白H3（1：20,000），CST 3638或小鼠抗组蛋白H4（1：10,000），CST 2935）重新探测1小时。将滤膜再次在PBST中洗涤，并在室温下用红外标记的二抗（IRDye 800Cw驴 - 抗小鼠IgG（1：20,000），Li-Cor 926-32212）孵育1小时。在PBST中最后一次使用后，使用Odyssey红外成像仪（Li-cor）扫描过滤器。为了分析来自给予Pinometostat（EPZ-5676）的大鼠的外周血单核细胞（PBMC）中H3K79甲基化的抑制，在变性凝胶上分级分离20μLPBMC全细胞裂解物，并通过用针对H3K79me2或总H3的抗体进行免疫印迹分析。使用Odyssey软件定量特异于H3K79me2抗体和总组蛋白H3对照抗体的信号强度。通过将H3K79me2信号强度除以相同泳道中的总组蛋白H3控制信号强度来归一化。
• 动物实验: 将PBS中的0.2mL MV4-11细胞悬浮液（1×10 7个细胞）皮下注射到雌性无胸腺裸鼠（Crl：NU（Ncr）-Foxn1nu）中。通过卡尺测量肿瘤，并且当肿瘤体积达到约100mma3时，在开始给予Pinometostat（EPZ-5676）之前，根据肿瘤大小将小鼠随机分成治疗组（n = 10）。 Pinometostat每天三次腹膜内给药，持续28天，10和20mg / kg，在10％乙醇的盐水溶液中。称重小鼠并用卡尺每周两次测量肿瘤直至研究结束。
• 参考文献:

  [1]. Daigle SR, et al. Potent inhibition of DOT1L as treatment for MLL-fusion leukemia. Blood. 2013 Jun 25. [Epub ahead of print]

  [2]. Klaus CR, et al. DOT1L inhibitor EPZ-5676 displays synergistic antiproliferative activity in combination with standard of care drugs and hypomethylating agents in MLL-rearranged leukemia cells. J Pharmacol Exp Ther. 2014 Sep;350(3):646-56.