1-异丙基-N-[(6-甲基-2-氧代-4-丙基-1,2-二氢-3-吡啶基)甲基]-6-[2-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-吡啶基]-1H-吲唑-4-甲酰胺

• 常用名: 1-异丙基-N-[(6-甲基-2-氧代-4-丙基-1,2-二氢-3-吡啶基)甲基]-6-[2-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-吡啶基]-1H-吲唑-4-甲酰胺
• 英文名: GSK343
• CAS号: 1346704-33-3
• 分子量: 541.687
• 密度: 1.3±0.1 g/cm3
• 沸点: 797.4±60.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₃₁H₃₉N₇O₂
• 熔点: N/A
• 闪点: 436.0±32.9 °C
• 符号: GHS07
• 信号词: Warning

用途

GSK343 是一种高效,选择性的 EZH2 抑制剂,IC50 为 4 nM。

名称

• 中文名: N-((2-羟基-6-甲基-4-丙基-3-吡啶基)甲基)-1-异丙基-6-(2-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-吡啶基)-1H-吲唑-4-甲酰胺
• 英文名: N-((2-hydroxy-6-methyl-4-propylpyridin-3-yl)methyl)-1-isopropyl-6-(2-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-4-yl)-1H-indazole-4-carboxamide
• 中文别名: 1-异丙基-N-[(6-甲基-2-氧代-4-丙基-1,2-二氢-3-吡啶基)甲基]-6-[2-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-吡啶基]-1H-吲唑-4-甲酰胺

生物活性

• 描述: GSK343 是一种高效,选择性的 EZH2 抑制剂,IC50 为 4 nM。
• 相关类别:
  信号通路 >> 自噬 >> 自噬
  信号通路 >> 表观遗传学 >> 表观遗传读者域
  信号通路 >> 表观遗传学 >> 组蛋白甲基转移酶
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  IC50: 4 nM (EZH2), 240 nM (EZH1)[1]

• 体外研究: GSK343在吡啶酮的4-位含有正丙基,其EZH2Kiapp = 1.2±0.2nM。在这项为期6天的增殖试验中,在本研究中评估的细胞系中,前列腺癌细胞系LNCaP对EZH2抑制最敏感,GSK343的生长IC50值为2.9μM[1]。发现GSK343在HeLa细胞中具有13μM的半数抑制浓度值,在SiHa细胞中具有15μM[2]。
• 体内研究: 与对照相比,GSK343(5mg/kg)处理的小鼠显示出显着抑制的肿瘤生长。 GSK343处理组的平均肿瘤体积和重量显着降低。早在植入后20天,相对于对照组,在GSK343处理的群组中观察到肿瘤生长显着减少;这种差异在研究的其余部分持续存在。此外,与对照组相比,异种移植模型中GSK343处理的动物显示E-钙粘蛋白的信使RNA水平显着增加,但波形蛋白信使RNA水平显着降低[2]。
• 激酶实验: 使用5个成员PRC2复合物（Flag-EZH2，EED，SUZ12，AEBP2，RbAp48）评估针对EZH2的活性。测定方案可总结如下：从100％DMSO中的固体制备10mM GSK343原液。以384孔格式（1：3稀释，第6和18列为等体积DMSO对照）制备11点连续稀释母板，并使用声学分配技术分配至测定准备板，以产生100nL GSK343和DMSO对照标记。 。测定添加物由等体积添加的10nM EZH2组成，并且使用多滴组合分配将底物溶液（5μg/ mL HeLa核小体和0.25μM[3H] -SAM）分配到测定板中。将反应板温育1小时，并用等体积添加的含有0.1mM未标记SAM的0.5mg / mL PS-PEI成像珠（RPNQ0098）淬灭。将板密封，暗适应30分钟，并使用Viewlux成像仪获得5分钟终点发光图像。使用ActivityBaseXE分析诸如Z'和背景信号以及剂量响应曲线的平板统计。使用与EZH2相同的384孔SPA测定法评估EZH1的体外生物化学活性作为5成员PRC2复合物的一部分。缓冲组分，试剂分配，GSK343平板制备，淬灭条件和数据分析对于EZH1和EZH2是相同的，最终测定浓度为20nMEZH1,5μg/ mL HeLa核小体和0.25μM[3H] -SAM。进一步的数据分析，pIC50枢轴和可视化由TIBCO Spotfire [1]启用。
• 细胞实验: 为了解释癌细胞系中不同的倍增率，通过检查它们在384孔板中在6天内以大范围的接种密度进行生长，对所有细胞系凭经验确定最佳细胞接种。然后将细胞以最佳接种密度接种并使其粘附过夜。用20点2倍稀释系列的GSK343或0.147％DMSO（载体对照）一式两份处理细胞，并在37℃，5％CO 2中温育6天。然后用每孔25μLCellTiter-Glo裂解细胞，用TECAN Safire2酶标仪定量化学发光。另外，在添加GSK343时（T0）收获未处理的细胞板以定量细胞的起始数。处理6天后的CTG值表示为T0值的百分比，并相对于GSK343浓度作图。数据与4参数方程拟合以产生浓度响应曲线，并确定抑制50％生长所需的GSK343浓度（gIC50）[1]。
• 动物实验: 小鼠[2]使用6周龄雌性裸BALB / c小鼠。为了研究EZH2抑制剂GSK343的作用，在肿瘤体积达到100mm 3后，每隔一天腹膜内注射5mg / kg的100μL磷酸盐缓冲盐水至BALB / c裸鼠（n = 6）。在该分析中，阴性对照组（n = 6）接受盐水。 40天后，杀死小鼠，手术切除皮下肿瘤，称重，拍照，切片，并在10％福尔马林中固定。通过实时逆转录聚合酶链反应测量肿瘤中E-钙粘蛋白，N-钙粘蛋白和波形蛋白的表达水平。
• 参考文献:

  [1]. Sharad K, et al. Identification of Potent, Selective, Cell-Active Inhibitors of the Histone Lysine Methyltransferase EZH2. ACS Med Chem Lett. 2012 Oct 19;3(12):1091-6.

  [2]. Ding M, et al. The polycomb group protein enhancer of zeste 2 is a novel therapeutic target for cervical cancer. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2015 May;42(5):458-64.

物理化学性质

• 密度: 1.3±0.1 g/cm3
• 沸点: 797.4±60.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₃₁H₃₉N₇O₂
• 分子量: 541.687
• 闪点: 436.0±32.9 °C
• 精确质量: 541.316528
• PSA: 99.41000
• LogP: 3.22
• 外观性状: , white to beige to brown
• 蒸汽压: 0.0±2.8 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.654
• 储存条件: 2-8°C
• 水溶解性: DMSO: soluble15mg/mL, clear

MSDS

MSDS英文版

安全信息

• 符号: GHS07
• 信号词: Warning
• 危害声明: H302
• 警示性声明: P301 + P312 + P330
• 危害码 (欧洲): Xn
• 风险声明 (欧洲): 22
• 危险品运输编码: NONH for all modes of transport

英文别名

• 1H-Indazole-4-carboxamide, N-[(1,2-dihydro-6-methyl-2-oxo-4-propyl-3-pyridinyl)methyl]-1-(1-methylethyl)-6-[2-(4-methyl-1-piperazinyl)-4-pyridinyl]-
• 3-methyl-1-(methylethyl)pyrazole-4-carboxylic acid
• 1-Isopropyl-N-[(6-methyl-2-oxo-4-propyl-1,2-dihydro-3-pyridinyl)methyl]-6-[2-(4-methyl-1-piperazinyl)-4-pyridinyl]-1H-indazole-4-carboxamide
• 1-Isopropyl-N-[(6-methyl-2-oxo-4-propyl-1,2-dihydro-3-pyridinyl)m ethyl]-6-[2-(4-methyl-1-piperazinyl)-4-pyridinyl]-1H-indazole-4-c arboxamide
• 1-(1-methylethyl)-N-[(6-methyl-2-oxo-4-propyl-1,2-dihydro-3-pyridinyl)methyl]-6-[2-(4-methyl-1-piperazinyl)-4-pyridinyl]-1H-indazole-4-carboxamide
• GSK343
• GSK-343