| 描述 |
3α-Aminocholestane 是含有选择性 SH2 结构域的肌醇-5'-磷酸酶 1 (SHIP1) 的抑制剂,其 IC50 值约为 2.5 μM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
IC50: 2.5 μM (SHIP1)[1]
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| 体外研究 |
通过3α-氨基胆碱(3AC)处理有效降低OPM2细胞活力。与OPM2细胞相比,RPMI8226和U266细胞对3α-氨基胆碱处理的敏感性显着降低,尽管在≥12.5μM的浓度下存活率显着降低。用3α-氨基胆碱处理36小时严重降低了S期细胞的百分比,这伴随着G2/M期细胞的增加。相反,在增殖较少的RPMI8226和U266细胞中,细胞周期进程在3α-氨基胆碱处理后在G0/G1期被阻断,同时降低了经历S期的细胞百分比[2]。
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| 体内研究 |
发现3α-氨基胆烷(3AC)导致体内多发性骨髓瘤(MM)生长减少,如通过OPM2攻击后血浆中游离人Igλ轻链的定量测定所确定的。此外,与载体对照相比,在3α-氨基胆甾烯处理的小鼠的外周血中观察到通过人HLA-ABC染色测定的循环OPM2细胞数量减少。最重要的是,3α-氨基胆碱处理导致肿瘤攻击后小鼠的存活显着增强。在抵抗治疗的3α-氨基胆碱处理的小鼠中,发现MM肿瘤表现出SHIP2的上调,使人联想到OPM2细胞的体外治疗,并且表明SHIP1抑制可以选择具有增加的SHIP2表达的肿瘤细胞[2]。
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| 细胞实验 |
用增加浓度的化合物（包括3α-氨基胆甾烷）一式三份或更多次处理细胞。根据制造商的说明用细胞计数试剂盒测定细胞活力。化合物（包括3α-氨基胆烷）处理细胞的优势密度（OD）除以其载体对照的OD，活力表示为未处理细胞的百分比。结果表示为三次单独实验的平均值±平均值的标准误差（SEM）。对于磷脂酰肌醇磷酸酯（PIP）反向实验，用10μMSHIP抑制剂（包括3α-氨基胆碱）处理MCF-7细胞2小时，之后洗涤细胞并加入新鲜培养基。随后在不存在（0μM）或存在（10或20μM）PtdIns（3,4）P2-diC16（P-3416）或PtdIns（3,5）P2-diC16（P-3516）的情况下培养细胞。持续36小时，之后细胞活力由细胞计数试剂盒确定[2]。
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| 动物实验 |
NOD / SCID /γcIL2R（NSG）小鼠腹膜内注射1×107个OPM2细胞，6小时后接受初始注射3α-氨基胆碱（3AC）或载体。将3α-氨基胆烷悬浮于11.46mM的0.3％Klucel / H2O溶液中，并通过腹膜内注射100μL溶液给药。载体处理的小鼠接受100μL注射0.3％Klucel / H 2 O溶液。然后在接下来的6天内每天用3α-氨基胆碱或载体处理小鼠，然后在剩余的15周生存研究中每周两次[2]。
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| 参考文献 |
[1]. Chen Z, et al. Signalling thresholds and negative B-cell selection in acute lymphoblastic leukaemia. Nature. 2015 May 21;521(7552):357-61. [2]. Gwenny M Fuhler, et al. Therapeutic Potential of SH2 Domain-Containing Inositol-5′-Phosphatase 1 (SHIP1) and SHIP2 Inhibition in Cancer. Mol Med. 2012 Feb 10;18:65-75.
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