描述 |
4E2RCat是eIF4E-eIF4G相互作用的抑制剂,IC50值为13.5 μM。
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相关类别 |
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靶点 |
IC50: 13.5 μM (eIF4E-eIF4G)[1]
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体外研究 |
4E2RCat防止eIF4E(帽结合蛋白)和eIF4G(大型支架蛋白)之间的相互作用,抑制帽依赖性翻译。它显着降低人类冠状病毒229E(HCoV-229E)的复制,降低了感染细胞和细胞内和细胞外感染性病毒滴度的百分比。 4E2RCat以剂量依赖性方式抑制帽依赖性翻译。 4E2RCat禁止与帽相关的FF转换,但不禁止EMCV IRES驱动的Ren转换。 4E2RCat以剂量和时间依赖的方式抑制冠状病毒复制[1]。
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体内研究 |
4E2RCat抑制体内蛋白质合成,而不是细胞死亡增加的结果[1]。
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细胞实验 |
将L132细胞用12.5μM4E2RCat处理指定的时间并加工用于膜联蛋白V /碘化丙锭染色。为此,收集细胞培养基。用1mL PBS洗涤细胞,也收集细胞,并在200μL0.05%胰蛋白酶-EDTA中胰蛋白酶消化。将细胞与先前收集的上清液合并,并在2,000rpm和4℃下旋转2分钟。将细胞沉淀用2mL冷PBS洗涤,然后再旋转。第二次旋转后,将细胞沉淀重悬于100μL膜联蛋白V结合缓冲液中,加入碘化丙啶至终浓度为5μg/ mL。加入5μL膜联蛋白V-荧光素异硫氰酸酯后,将样品在室温下避光孵育15分钟并稀释。使用FACScan仪器[1]进行荧光激活细胞分选仪(FACS)分析。
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参考文献 |
[1]. Cencic R, et al. Blocking eIF4E-eIF4G interaction as a strategy to impair coronavirus replication. J Virol. 2011 Jul;85(13):6381-9.
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