| 描述 |
Encenicline (EVP-6124) 是一种新型 α7 神经元烟碱乙酰胆碱受体 (nAChRs)激动剂。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
α7 nAChR[1]
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| 体外研究 |
Encenicline(EVP-6124)取代[3H] -MLA(Methyllycaconitine)(Ki = 9.98 nM,pIC50 = 7.65±0.06,n = 3)和[125I]-α-银环蛇毒素(Ki = 4.33 nM,pIC50 = 8.07±0.04) ,n = 3)。在使用[3H] -MLA的结合测定中测量,Encenicline(EVP-6124)的效力比天然激动剂ACh(Ki =3μM)高约300倍。 Encenicline在10nM时抑制5-HT3受体51％,这是测试的最低浓度。对CHO细胞中表达的人5-HT2B受体的评估表明,在IC50为16μM时,[3H] -美舒麦角(Ki = 14nM)的置换和仅在大鼠胃底测定中的拮抗剂活性。在结合和功能实验中,Encenicline显示α7nAChRs的选择性,并且不激活或抑制异聚α4β2nAChRs[1]。
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| 体内研究 |
Encenicline(EVP-6124)具有良好的脑渗透性和足够的暴露时间。 Encenicline(EVP-6124)(0.3 mg/kg,po)在物体识别任务(ORT)中显着恢复东莨菪碱处理的大鼠(0.1 mg/kg,ip)的记忆功能。尽管多奈哌齐为0.1mg/kg,po或Encenicline为0.03mg/kg,但po在该任务中没有改善记忆,这些亚有效剂量的共同给药完全恢复记忆。在自然遗忘测试中,具有24小时保留时间的ORT,Encenicline改善记忆在0.3mg/kg,po这种改善被选择性α7nAChR拮抗剂甲基-乌头碱(0.3mg/kg,ip或10μg,icv)阻断。发现Encenicline(EVP-6124)与大鼠血浆蛋白中度结合,平均fu为0.11±0.01(平均值±SD)或11％。在0.1-30mg/kg的范围内,po,Encenicline(EVP-6124)表明比例剂量递增。尽管大脑浓度在2到8小时之间保持相似,但Tmax在血浆和2小时脑中为4小时。 B：P比率在1到8小时之间为1.7-5.1 [1]。药代动力学研究表明,Encenicline(EVP-6124)(0.4mg/kg,ip)在给药后2小时达到峰值脑浓度,并保持有效浓度至少4小时。 Entnicline(EVP-6124)以ZT0(0.4mg/kg ip单剂量)给予WT小鼠,并且显着增加4小时后获得的切片中NMDAR的饱和指数,而不会导致长时间的觉醒或增强的运动活性[2]。
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| 激酶实验 |
在承包商规定的条件下，根据标准验证的方案，在选择性组中以10μM测量EVP-6124的结合或活性。对于5-HT2A受体结合测定，从表达人重组5-HT2A受体的HEK293细胞制备膜。对于5-HT2B和5-HT2C受体结合测定，从表达人重组5-HT2B或5-HT2C受体的CHO细胞制备膜。通过将不同浓度的EVP-6124在结合缓冲液中孵育1小时来确定亲和力。对于5-HT2A结合，在0.5nM [3H] - 酮色林存在下，在22℃温育;对于5-HT2B，在22℃下存在2nM [3H] - 美舒麦碱;对于5-HT2C，在37℃，1nM [3H] - 美舒麦兰存在下。对于5-HT2A，5-HT2B或5-HT2C，分别在1μM酮色林，10μM美舒麦角或10μMRS-102221存在下测定非特异性结合。所有测量一式三份进行。还在5-HT2B大鼠胃底组织反应测定中测试EVP-6124。简而言之，等长地测量α-甲基5-羟色胺诱导的收缩的抑制。所有测量均一式两份进行[1]。
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| 动物实验 |
大鼠[1]使用24只2.5个月大的雄性Wistar大鼠（平均体重：329g）。在测试Encenicline之前，确定东莨菪碱单独在0.03,0.1或0.3mg / kg，在ORT中ip的作用（每次处理n = 8）。在T1之前30分钟注射东莨菪碱（0.1mg / kg，腹膜内注射），当使用1小时间隔时，在T2时导致强烈的缺陷。 d2指数与表现的机会水平没有显着差异;与盐水相比，0.1mg / kg，东莨菪碱ip的探索行为没有变化。随后，测试了Encenicline逆转由0.1mg / kg东莨菪碱诱导的记忆障碍的能力。首先，在T1前30分钟给予东莨菪碱，然后给予Encenicline（0.03,0.1,0.3和1.0mg / kg，口服）。对于对照处理，动物接受去离子水（po）加盐水（ip）或去离子水（po）加0.1mg / kg东莨菪碱（ip）。小鼠[2]在整个研究中使用成年雄性小鼠（3-6个月大）。在动物设施中，在清醒小鼠（对于该实验总计9只小鼠）中，在Zeitgeber时间（ZT0）腹膜内注射Encenicline（0.4mg / kg）。然后立即将小鼠与其兄弟姐妹一起放回其家笼中并静置4小时（ZT4）。在此期间，他们会受到密切监控，以检查Encenicline注射可能产生的行为影响。所有9只注射的小鼠在注射后的一小时内嵌套并且不动。
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| 参考文献 |
[1]. Prickaerts J, et al. EVP-6124, a novel and selective α7 nicotinic acetylcholine receptor partial agonist, improves memory performance by potentiating the acetylcholine response of α7 nicotinic acetylcholine receptors. Neuropharmacology. 2012 Feb;62(2):109 [2]. Thomas Papouin, et al. Septal Cholinergic Neuromodulation Tunes the Astrocyte-Dependent Gating of Hippocampal NMDA Receptors to Wakefulness. Neuron. 2017 May 17;94:1-15.
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