| 描述 |
Selumetinib是一种高效的 MEK 抑制剂, 抑制MEK1的 IC50 为14 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
MEK:12 nM (IC50)
MEK1:14 nM (IC50)
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| 体外研究 |
Selumetinib引起原发性DNA合成和细胞活力的时间和剂量依赖性降低,诱导与原代2-1318细胞中ERK失活相关的生长停滞和凋亡[1]。 Selumetinib(1μM)通过G0/G1阻滞对H-441,H-1437细胞显示出抗增殖作用[2]。 Selumetinib(ARRY-142886)导致几种含有B-Raf和Ras突变的细胞系的生长抑制,但对正常成纤维细胞系没有影响[3]。
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| 体内研究 |
Selumetinib(AZD6244,50和100mg/kg,po)以剂量依赖性方式降低4-1318异种移植物的生长速率;当以50mg/kg的剂量给予时,AZD6244也显着抑制5-1318,2-1318,26-1004和29-1104异种移植物的生长[1]。 Selumetinib(ARRY-142886,10,25,50或100mg/kg,po)能够抑制裸鼠中ERK1/2磷酸化和HT-29异种移植肿瘤的生长。肿瘤消退也见于BxPC3异种移植模型[3]。
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| 激酶实验 |
通过测量来自[γ-33P] ATP的[γ-33P]磷酸盐掺入ERK2来评估MEK1的活性。该试验在96孔聚丙烯板中进行，培养混合物（100μL）由25mM HEPES（pH7.4），10mMMgCl2,5mMβ-甘油磷酸盐，100μM原钒酸钠，5mM DTT，5组成。 nMMEK1,1μMERK2和0至80nM selumetinib（终浓度为1％DMSO）。通过添加10μMATP（具有0.5μCk[γ-33P] ATP /孔）引发反应，并在室温下孵育45分钟。加入等体积的25％三氯乙酸以终止反应并沉淀蛋白质。将沉淀的蛋白质捕获到玻璃纤维B滤板上，用0.5％磷酸洗去过量的标记的ATP，并在液体闪烁计数器中计数放射性。通过改变反应混合物中ATP的量来确定ATP依赖性。
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| 细胞实验 |
将原代HCC细胞以每孔2.0×104的密度接种在生长培养基中。在生长培养基中48小时后，用MEM冲洗细胞单层两次。用各种浓度的Selumetinib（AZD6244,0,0.5,1.0,2.0,3.0和4.0μM）处理细胞24或48小时。通过MTT测定确定细胞活力。如制造商所述，使用溴脱氧尿苷试剂盒测定细胞增殖。实验至少重复三次，数据表示为平均值±SE。
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| 动物实验 |
为了研究Selumetinib（AZD6244）对HCC异种移植物的作用，将AZD6244以适当的浓度悬浮于水中。携带HCC异种移植物的小鼠每天两次给予，每100克体重100μL水（n = 12）或50mg（n = 12）或100mg（n = 12）AZD6244，持续21天，从肿瘤植入后第7天开始。通过游标卡尺测量肿瘤的长度（a）和宽度（b），每周至少监测已建立的肿瘤异种移植物的生长。肿瘤体积计算为（a×b2）/ 2。在最后一剂ADZ6244后3小时处死动物，记录体重和肿瘤重量，收集肿瘤用于分析。
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| 参考文献 |
[1]. Huynh H, et al, Targeted inhibition of the extracellular signal-regulated kinase kinase pathway with AZD6244 (ARRY-142886) in the treatment of hepatocellular carcinoma. Mol Cancer Therapy, 2007, 6 (1), 138-146 [2]. Garon EB, et al. Identification of common predictive markers of in vitro response to the Mek inhibitor selumetinib (AZD6244; ARRY-142886) in human breast cancer and non-small cell lung cancer cell lines. Mol Cancer Thera, 2010, 9 (7), 1985-1994. [3]. Yeh TC, et al. Biological characterization of ARRY-142886 (AZD6244), a potent, highly selective mitogen-activated protein kinase kinase 1/2 inhibitor. Clin Cancer Res, 2007, 13 (5), 1576-1583. [4]. Sebolt-Leopold JS, et al. Targeting the mitogen-activated protein kinase cascade to treat cancer. Nat Rev Cancer. 2004 Dec;4(12):937-47. [5]. Dela Cruz FS, et al. A case study of an integrative genomic and experimental therapeutic approach for rare tumors: identification of vulnerabilities in a pediatric poorly differentiated carcinoma. Genome Med. 2016 Oct 31;8(1):116. [6]. Weisberg E, et al. Upregulation of IGF1R by mutant RAS in leukemia and potentiation of RAS signaling inhibitors by small-molecule inhibition of IGF1R. Clin Cancer Res. 2014 Nov 1;20(21):5483-95.
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