| 描述 |
BIIB021 是一种可口服的全合成的 HSP90 抑制剂,Ki 值和 EC50 值分别为 1.7 nM 和 38 nM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
HSP90:1.7 nM (Ki)
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| 体外研究 |
BIIB021结合在Hsp90的ATP结合口袋中,干扰Hsp90伴侣功能,并导致客户蛋白质降解和肿瘤生长抑制。 BIIB021抑制肿瘤细胞(BT474,MCF-7,N87,HT29,H1650,H1299,H69和H82)增殖,IC50为0.06-0.31μM。 BIIB021诱导Hsp90客户蛋白的降解,包括HER-2,Akt和Raf-1,并且上调热休克蛋白Hsp70和Hsp27的表达[1]。 BIIB021抑制霍奇金淋巴瘤细胞(KM-H2,L428,L540,L540cy,L591,L1236和DEV),IC50为0.24-0.8μM。 BIIB021显示来自健康个体的淋巴细胞的低活性。尽管有缺陷的IκB,BIIB021抑制NF-κB的组成性活性。 BIIB021诱导霍奇金淋巴瘤细胞上激活NK细胞受体NKG2D的配体表达,导致对NK细胞介导的杀伤的易感性增加[2]。 BIIB021增强HNSCCA细胞系(UM11B和JHU12)的体外放射敏感性,相应降低关键放射应答蛋白的表达,增加凋亡细胞并增强G2阻滞[3]。 BIIB021比针对肾上腺皮质癌H295R的17-AAG活性高得多。 BIIB021的细胞毒活性不受NQO1或Bcl-2过表达的损失的影响,这些分子病变不会阻止客户端丢失,但仍与17-AAG的细胞杀伤减少有关。 BIIB021在17-AAG抗性细胞系(NIH-H69,MES SA Dx5,NCI-ADR-RES,Nalm6)中也有活性[4]。
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| 体内研究 |
BIIB021的口服给药导致许多肿瘤异种移植模型中的肿瘤生长抑制,包括N87,BT474,CWR22,U87,SKOV3和Panc-1 [1]。 BIIB021以120 mg/kg的剂量有效抑制L540cy肿瘤的生长[2]。 BIIB021显着增强JHU12异种移植物中辐射的抗肿瘤生长作用[3]。
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| 激酶实验 |
对于荧光偏振竞争测量，将FITC-格尔德霉素探针（20nM）在室温下用2mM TCEP还原3小时，之后将溶液等分并储存在-80℃直至使用。将重组人Hsp90α（0.8nM）和还原的FITC-格尔德霉素（2nM）在含有20mM HEPES（pH7.4），50mM KCl，5的测定缓冲液的存在下，在室温下在96孔微量培养板中孵育3小时。 mM MgCl 2,20mM Na 2 MoO 4,2mM DTT，0.1mg / mL BGG和0.1％（v / v）CHAPS。在该预温育后，然后加入100％DMSO中的BIIB021至终浓度0.2nM至10μM（终体积100μL，2％DMSO）。将反应物在室温下温育16小时，然后在Analyst读板仪中测量荧光，激发= 485nm，发射= 535nm。高和低对照分别不含BIIB021或不含Hsp90。数据适合四参数曲线并生成IC50。
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| 细胞实验 |
使用改良的四唑盐测定来测量IC 50。将肿瘤细胞加入96孔板中并在加入BIIB021之前繁殖24小时。将BIIB021添加到镀覆的细胞中。包含DMSO（0.03-0.003％）作为媒介物对照。孵育后，吩嗪硫酸甲酯（原料浓度1 mg / mL）和3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧基甲氧基苯基）-2-（4-磺基苯基）-2H-四唑盐，内盐（将原液浓度2mg / mL）以1:20的比例混合，并加入到96孔板的每个孔中。还原3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧基甲氧基苯基）-2-（4-磺基苯基）-2H-四唑鎓，内盐产生可溶性甲product产物，其分泌到培养基。温育4小时后，在490nm的波长下用分光光度法定量甲product产物。使用SOFTmaxPRO软件获取数据，100％活力定义为用3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧基甲氧基苯基）-2-（4-）染色的DMSO处理细胞的A490磺基苯基）-2H-四唑鎓，内盐（用DMSO处理的细胞的平均A490，范围为0.03-0.003％）。如下从A490值计算每个样品的活力百分比：％活力=（A490nm样品/ A490nm DMSO处理的细胞×100）。 IC 50定义为引起50％细胞活力抑制的浓度。
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| 动物实验 |
BALB / c和无胸腺小鼠在6至8周时从Harlan Sprague-Dawley获得。将小鼠保持在通气笼养系统中的灭菌笼中，其中12小时光照/ 12小时黑暗光周期，温度为21℃至23℃，相对湿度为50±5％。随意提供经辐照的颗粒状食物和高压灭菌的去离子水。通过使用单独编号的耳标识别动物。将N87肿瘤碎片（约2mm 3）皮下植入动物的右侧。在接种BT474之前，放置1.7 mg / 90天释放17β-雌二醇颗粒sc BIIB021以31,62.5和125 mg / kg的剂量给予携带N87胃癌肿瘤的动物，每周一次，从周一到周五，共5天周。使用卡尺测量肿瘤尺寸，并使用椭圆球（l×w2）/ 2 = mm3的等式计算肿瘤体积，其中l和w分别表示在每次测量时收集的越来越大的尺寸。测量肿瘤体积并称重动物并每周至少两次监测毒性。使用双尾学生t检验计算P值，以评估对照组和治疗组之间肿瘤体积的差异。 P <0.05被认为是显着的。
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| 参考文献 |
[1]. Lundgren, Karen., et al. BIIB021, an orally available, fully synthetic small-molecule inhibitor of the heat shock protein Hsp90. Molecular Cancer Therapeutics (2009), 8(4), 921-929. [2]. B?ll B, et al. Heat shock protein 90 inhibitor BIIB021 (CNF2024) depletes NF-kappaB and sensitizes Hodgkin's lymphoma cells for natural killer cell-mediated cytotoxicity. Clin Cancer Res. 2009 Aug 15;15(16):5108-16. [3]. Yin X, et al. BIIB021, a novel Hsp90 inhibitor, sensitizes head and neck squamous cell carcinoma to radiotherapy. Int J Cancer. 2010 Mar 1;126(5):1216-25. [4]. Zhang H, et al. BIIB021, a synthetic Hsp90 inhibitor, has broad application against tumors with acquired multidrug resistance. Int J Cancer. 2010 Mar 1;126(5):1226-34.
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