莫托泊尼硫酸盐

Momelotinib (CYT387) sulfate 是一种 ATP竞争性的 JAK1/JAK2 抑制剂,IC50 分别为 11 nM/18 nM,作用于JAK3时,IC50 为 155 nM。

信号通路 >> 自噬 >> 自噬

研究领域 >> 癌症

JAK1:11 nM (IC50)

JAK2:18 nM (IC50)

JAK3:155 nM (IC50)

莫托替尼(CYT387)抑制Ba/F3-JAK2V617F和人红白血病(HEL)细胞(IC50 =1.5μM)或Ba/F3-MPLW515L细胞(IC50 = 200 nM)的生长,但对携带K562的BCR-ABL具有相当低的活性。细胞(IC50 =58μM)和含有MV4-11细胞的FLT3突变(IC50 =3μM)。用IL-3刺激的亲本Ba/F3细胞(Ba/F3-wt)的增殖被抑制,IC50值为1.4μM,这与IL-3依赖性信号传导在亲本细胞系中确定的作用一致[1]。

在疾病模型(50和100mg/kg)中使用两倍剂量的莫莫替尼(CYT387)在8周的时间内对外周血计数几乎没有影响。较低剂量的中位血浆峰浓度为7.1μM,较高剂量的中位血浆峰浓度为32.1μM,半衰期约为2小时。 12小时的谷浓度对于25mg/kg是10nM,对于50mg/kg剂量是900nM。在移植后第34天,整个群组的平均白细胞计数和血细胞比容值超过Balb/c小鼠的正常范围超过1SD。此时,处死6只小鼠并进行尸检。在剩余的动物中,用25mg/kg莫莫替尼(CYT387),50mg/kg莫莫替尼(CYT387)或媒介物开始治疗,每天通过口服强饲法给药两次(每个治疗组12只小鼠)。早在治疗开始后6天,两个剂量组中白细胞计数的快速下降是显而易见的,并且在20天后血细胞比容下降是明显的[2]。口服给药后,莫莫替尼(CYT387)表现出高血浆浓度(Cmax =40.4μM; Tmax = 4h),具有定量的绝对口服生物利用度和2.4h的表观半衰期。高口服生物利用度可能部分归因于莫莫替尼(CYT387)的低血清清除率(6.3 mL/min/kg),因此对肝脏首过代谢的易感性较低[3]。

在用于肽底物磷酸化测定之前纯化在昆虫细胞中表达的谷胱甘肽-S-转移酶（GST）标记的JAK激酶结构域。使用Alphascreen蛋白酪氨酸激酶P100检测试剂盒和PerkinElmer Fusion Alpha仪器在384孔optiplates中进行检测[1]。

使用表达JAK2V617F（Ba / F3-JAK2V617F）和MPLW515L（Ba / F3-MPLW515L）突变体的Ba / F3细胞，以及CHRF-288-11（JAK2T875N）和CMK（JAK3A572V）细胞。产生TEL / JAK2和TEL / JAK3融合物并将其引入Ba / F3鼠细胞中。将TEL / JAK2-或TEL / JAK3-转染的细胞在含有10％胎牛血清（FCS）的Dulbecco改良的Eagle培养基（DMEM）中培养。在含有补充有5ng / mL鼠IL-3的10％FCS的RPMI中培养Ba / F3野生型细胞。在37℃，5％CO 2下孵育72小时后，使用Alamar Blue测定法测量增殖[1]。

小鼠[2]在骨髓移植后第32天（当所有小鼠表现出严重的白细胞增多和红细胞增多症时），将小鼠分成3组，使得每组具有相等的平均体重和血细胞计数。将莫莫替尼（CYT387）溶于NMP（120mg / mL终浓度; 1-甲基-2-吡咯烷酮，Chromasolv Plus）中。随后，将莫莫替尼/ NMP混合物用0.14M Captisol稀释至浓度为6mg / mL，并进一步用0.1M Captisol稀释至终浓度为4mg / mL。从骨髓移植后第34天至第82天（实验结束），每天两次，以10至12小时的间隔，通过口服管饲法给予所有3组小鼠（每组n = 12）莫莫替尼（CYT387）。小鼠接受不含莫莫替尼（CYT387）（0mg / kg组），25mg / kg莫莫替尼或50mg / kg莫莫替尼的NMP / Captisol。在骨髓移植后第82天，对所有小鼠实施安乐死进行分析，除了来自50mg / kg和25mg / kg组的2只小鼠，其从莫莫替尼（CYT387）处理中取出并再追踪45天。为了评估莫莫替尼（CYT387）对正常血细胞计数的影响，以与骨髓移植相同的方式给予幼稚Balb / c小鼠载体对照，50mg / kg或100mg / kg莫莫替尼（CYT387）。实验性小鼠队列。在第14天，第28天，第42天和第56天抽取外周血，并分析红细胞，白细胞，网织红细胞，粒细胞，淋巴细胞和单核细胞的水平。

[1]. Pardanani A, et al. CYT387, a selective JAK1/JAK2 inhibitor: in vitro assessment of kinase selectivity and preclinical studies using cell lines and primary cells from polycythemia vera patients. Leukemia, 2009, 23(8), 1441-1445.

[2]. Tyner JW, et al. CYT387, a novel JAK2 inhibitor, induces hematologic responses and normalizes inflammatory cytokines in murine myeloproliferative neoplasms. Blood, 2010, 115(25), 5232-5240.

[3]. Burns CJ, et al. Phenylaminopyrimidines as inhibitors of Janus kinases (JAKs). Bioorg Med Chem Lett. 2009 Oct 15;19(20):5887-92.

巴瑞克替尼 | 乌帕替尼 | 帕西替尼(SB1518) | Momelotinib | 5-氯-N2-[(1S)-1-(5-氟-2-嘧啶基)乙基]-N4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-2,4-嘧啶二胺 | TG-101348 | (2E)-3-(6-溴-2-吡啶基)-2-氰基-N-[(1S)-1-苯基乙基]-2-丙烯酰胺 | CHZ868 | 1-环丙基-3-(3-(5-(吗啉甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-吡唑-4-基)脲 | N-[5-[4-[(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)甲基]苯基][1,2,4]三唑并[1,5-A]吡啶-2-基]环丙烷甲酰胺 | 伊他替尼 | 赛度替尼 | 盐酸巴多昔芬 | 14-甲基-20-氧杂-5,7,14,27-四氮杂四环[19.3.1.1(2,6).1(8,12)]二十七碳-1(25),2,4,6(27),8,10,12(26),16,21,23-十烯 | 吡西替尼