1221186-53-3

• 常用中文名：ML265(TEPP-46)
• 常用英文名：ML 265
• CAS号：1221186-53-3
• 分子式：C₁₇H₁₆N₄O₂S₂
• 分子量：372.465
• 相关类别： 信号通路 代谢酶/蛋白酶 丙酮酸激酶
• 发布时间：2016-12-09 12:44:00
• 更新时间：2024-01-06 22:30:49
• TEPP-46 是一种有效,选择性的丙酮酸激酶 M2 (pyruvate kinase M2) 激活剂,IC50 值为 92 nM,对 PKM1,PKL 和 PKR 作用较小或没有作用。

名称

• 中文名: 特普-46
• 英文名: 6-[(3-aminophenyl)methyl]-4-methyl-2-methylsulfinylthieno[3,4]pyrrolo[1,3-d]pyridazin-5-one
• 中文别名: 6-[(3-氨基苯基)甲基]-4,6-二氢-4-甲基-2-(甲基亚磺酰)-5H-噻吩并[2',3':4,5]吡咯并[2,3-D]哒嗪-5-酮
• 英文别名: 6-[(3-aminophenyl)methyl]-4,6-dihydro-4-methyl-2-(methylsulfinyl)-5h-thieno[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyridazin-5-one; ML265; 6-(3-Aminobenzyl)-4-methyl-2-(methylsulfinyl)-4,6-dihydro-5H-thieno[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyridazin-5-one; 5H-Thieno[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyridazin-5-one, 6-[(3-aminophenyl)methyl]-4,6-dihydro-4-methyl-2-(methylsulfinyl)-; QC-1848; 2-methylsulfinyl-4-methyl-6-[(3-aminophenyl)methyl]-4H-thieno[3,2-b]pyrrole[3,2-d]pyridazinone; TEPP-46

物化性质

• 密度: 1.6±0.1 g/cm3
• 沸点: 711.6±70.0 °C at 760 mmHg
• 分子式: C₁₇H₁₆N₄O₂S₂
• 分子量: 372.465
• 闪点: 384.2±35.7 °C
• 精确质量: 372.071472
• PSA: 130.36000
• LogP: 0.61
• 外观性状: 粉末
• 蒸汽压: 0.0±2.3 mmHg at 25°C
• 折射率: 1.805
• 储存条件: -20℃

生物活性

• 描述: TEPP-46 是一种有效,选择性的丙酮酸激酶 M2 (pyruvate kinase M2) 激活剂,IC50 值为 92 nM,对 PKM1,PKL 和 PKR 作用较小或没有作用。
• 相关类别:
  信号通路 >> 代谢酶/蛋白酶 >> 丙酮酸激酶
  研究领域 >> 癌症
• 靶点:

  AC50: 92 nM (PKM2)

• 体外研究: TEPP-46和DASA-58通过类似于内源性活化剂FBP的机制激活PKM2。用TEPP-46或DASA-58预处理细胞可防止过钒酸盐诱导的PKM2活性抑制。 TEPP-46还诱导细胞内乙酰辅酶A,乳酸,磷酸核糖和丝氨酸水平的降低[1]。 TEPP-46抑制LPS诱导的Hif-1α和IL-1β,以及一系列其他Hif-1α依赖性基因的表达。 TEPP-46处理显着下调M1标记Il12p40和Cxcl-10的表达。使用TEPP-46激活PKM2显着抑制FSL-1和CpG诱导的Il1b mRNA表达。 TEPP-46抑制Mtb诱导的Il1b mRNA水平,增强Mtb诱导的Il10 mRNA水平,并且对Tnf水平没有影响[2]。
• 体内研究: TEPP-46表现出良好的口服生物利用度,具有相对低的清除率,长的半衰期和良好的分布参数-预测肿瘤组织中的药物暴露。 150mg/kg的TEPP-46容易实现在A549异种移植肿瘤中测量的最大PKM2活化[1]。
• 激酶实验: 如前所述，通过监测乳酸脱氢酶（LDH）的丙酮酸依赖性NADH向NAD +的转化来测量丙酮酸激酶活性。简而言之，对于细胞系实验，在用DMSO或活化剂处理开始前1小时用新鲜培养基替换培养基。此外，如果表明，在细胞裂解前10分钟加入100μM过钒酸盐。用含有2mM DTT和蛋白酶抑制剂的NP-40缓冲液在冰上裂解细胞，并通过以21,000×g离心澄清。将5μL上清液用于评估丙酮酸激酶活性。随后将丙酮酸激酶活性标准化为总蛋白含量。
• 细胞实验: 在处理开始前24小时，将2,000个细胞接种在96孔板中。 CellTiter96®AQueous用于评估氧化剂和PKM2激活剂组合处理后的细胞活力。 MTS：（3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧基甲氧基苯基）-2-（4-磺基苯基）-2H-四唑鎓）。
• 动物实验: 具有组成型表达小鼠PKM1 cDNA（H1299-PKM1细胞）的H1299亲本和H1299细胞在补充有10％胎牛血清，青霉素/链霉素，2mM谷氨酰胺和潮霉素的RPMI中繁殖用于转基因选择。收获细胞，重悬浮于无菌PBS中，并将5×10 5个细胞皮下注射到nu / nu小鼠中。通过卡尺测量监测肿瘤生长，处死小鼠并在指定的时间后收获肿瘤。将肿瘤称重，分开并在液氮中快速冷冻或在福尔马林中固定用于后续分析。
• 参考文献:

  [1]. Anastasiou D, et al. Pyruvate kinase M2 activators promote tetramer formation and suppress tumorigenesis. Nat Chem Biol. 2012 Oct;8(10):839-847.

  [2]. Palsson-McDermott EM, et al. Pyruvate kinase M2 regulates Hif-1α activity and IL-1β induction and is a critical determinant of the warburg effect in LPS-activated macrophages. Cell Metab. 2015 Jan 6;21(1):65-80.