| 描述 |
Evofosfamide (TH-302) 是一种缺氧 (hypoxia) 激活前药,缺氧 (N2) 和常氧 (21% O2) 环境下,IC50 分别为 10 μM 和 1000 μM。
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| 相关类别 |
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| 靶点 |
Hypoxia-activated prodrug[1]
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| 体外研究 |
Evofosfamide(TH-302)诱导γH2AX和细胞凋亡。 Evofosfamide显示缺氧选择性和浓度依赖性细胞毒活性,在p53-熟练和缺陷细胞中均相当。单独使用Evofosfamide(TH-302)治疗会导致G2/M细胞的积聚。用Evofosfamide处理的细胞中PF47736对Chk1的抑制减少了常氧和缺氧下的Evofosfamide(TH-302)介导的G2/M阻滞[1]。
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| 体内研究 |
Evofosfamide(TH-302)是一种缺氧激活的前药,已知可在实体瘤中常见的低氧条件下选择性激活。在Hs766t肿瘤中,Evofosfamide(TH-302)治疗小鼠的归一化Ktrans平均值降低69.2％,Mia PaCa-2肿瘤降低46.1％,SU.86.86肿瘤降低4.9％。与他们自己的对照组相比,Hs766t和Mia PaCa-2治疗组的两项变化均具有统计学意义(P <0.01)[2]。 95％氧气呼吸后,低氧组分(HF)显着降低至2.1％±4.7％(P <0.001),而7％氧气呼吸显着增加HF至29.5％±14.7％(P = 0.029)。暴露携带横纹肌肉瘤的大鼠增加氧气条件可以消除TH-302的作用,并将T4×SV从20.4±3.5降低到15.3±2.5天(P = 0.007),而对照动物的T4×SV增加。与放疗联合使用时,TH-302治疗肿瘤的T4×SV从30.8±5.9(Evofosfamide(TH-302)+放疗)降至25.7±2.9天(Evofosfamide(TH-302)+放疗+ 95％O2) [3]。
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| 细胞实验 |
在常氧（21％O 2）或缺氧（N 2）下，用0.1μMPF477736或AZD7762和Evofosfamide（TH-302）处理细胞2小时。洗涤后，在常氧条件下，在Chk1抑制剂存在下将细胞再培养22小时。将细胞固定在75％乙醇中，并使用细胞周期试剂和番石榴流式细胞术测定细胞周期分布。在常氧（21％O2）或缺氧条件下，将HT-29细胞暴露于Evofosfamide（TH-302）e（8 nM，40 nM，200 nM，1μM和5μM）和0.1μMAZD77622小时（ N2）。洗涤后，在0.1μM的AZD7762存在下将细胞连续培养46小时。进行基于发光的半胱天冬酶活性测定[1]。
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| 动物实验 |
小鼠[2] 5-6周龄的雌性SCID小鼠在左后腿皮下接种SU.86.86，Hs766t或Mia-PaCa2细胞（5×106）。允许肿瘤平均生长三周至平均大小~150mm 3。然后将小鼠随机化并置于组群中并用盐水（对照）或经腹膜内注射的Evofosfamide（TH-302）（50mg / kg）处理。共有34只小鼠接受了MR成像研究。 SU.86.86组由5只TH-302处理的动物和5只对照动物组成; Mia-PaCa2由6种Evofosfamide处理和5只对照动物组成; Hs766t由7种经Evofosfamide处理和6只对照动物组成。当肿瘤达到2000mm 3时，处死动物。将大鼠[2]同源横纹肌肉瘤R1肿瘤（1mm 3）皮下植入成年WAG / Rij大鼠的侧腹。在平均肿瘤体积为4.2cm 3（范围，2.0-8.1）时开始实验以确保稳定的HF。连续4天给予治疗，并且用腹膜内注射（ip; QD×4）和NaCl或Evofosfamide（TH-302）（25,50或75mg / kg）组成。在开始治疗之前，使用[18 F] HX4进行PET扫描。放射疗法在治疗的第3天以0,4,8或12Gy的单剂量施用，在NaCl或Evofosfamide（TH-302）注射后3小时，在氧气修饰后1小时施用。在PET成像和放射治疗期间，使用氯胺酮/甲苯噻嗪（ip分别为66.7和6.7mg / kg）的混合物麻醉大鼠。在治疗5天期间（1天PET成像，用Evofosfamide或载体注射4天），动物每天暴露于改变的氧浓度4小时以改变肿瘤的HF。烟酰胺（ip 500 mg / kg）和carbogen（95％氧气，5％CO2; 5 L /分钟）的氧气组合改变由烟酰胺注射组成，30分钟后暴露于碳水化合物呼吸3.5小时。在烟酰胺/碳水化合物处理的中间，施用NaCl / Evofosfamide。在最初2小时后用NaCl / Evofosfamide注射给予减少的氧气呼吸（7％，残留的N2; 2.5L /分钟）4小时。注射[18F] HX4 PET示踪剂[平均18.8 MBq，范围7.1-25.1 MBq;在氧气修饰结束前2小时给予使用静脉注射线（Venoflux 0.4mm G27）用10％肝素冲洗的侧尾静脉。在示踪剂注射后3小时进行PET成像。
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| 参考文献 |
[1]. Meng F, et al. Enhancement of hypoxia-activated prodrug TH-302 anti-tumor activity by Chk1 inhibition. BMC Cancer. 2015 May 21;15:422. [2]. Zhang X, et al. MR Imaging Biomarkers to Monitor Early Response to Hypoxia-Activated Prodrug TH-302 in Pancreatic Cancer Xenografts. PLoS One. 2016 May 26;11(5):e0155289. [3]. Peeters SG, et al. TH-302 in Combination with Radiotherapy Enhances the Therapeutic Outcome and Is Associated with Pretreatment [18F]HX4 Hypoxia PET Imaging. Clin Cancer Res. 2015 Jul 1;21(13):2984-92.
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