| 体外研究 |
自噬蛋白-2(化合物7h)(0-200μM,48小时)显示出对各种癌细胞的抗生存活性[1]。自噬蛋白-2(0-20μM,0-48小时)通过以p62依赖性方式下调染色质泛素化来抑制自噬通量并损害DNA修复[1]。自噬蛋白-2(0-20μM,48小时)诱导细胞周期阻滞在S期,并诱导线粒体依赖性内源性凋亡[1]。细胞存活率测定[1]细胞系：MDA-MB-231、MDA-MB-468、SCC25、HSC-3、HCT116、SW620、PC3、Aspc、PNAC、U87、U251和LN229浓度：0-200μM孵育时间：48小时结果：显示抗存活活性,IC50值为8.31±1.05、6.03±0.82、18.64±2.92、24.03±3.75、35.53±7.52、25.43±2.42、17.48±1.27、26.89±5.23、19.25±3 15.37±1.78,对MDA-MB-231、MDA-MB-468、SCC25、HSC-3、HCT116、SW620、PC3、Aspc、PNAC、U87、U251和LN229细胞分别为12.92±2.38和61.35±11.61μM。Western印迹分析[1]细胞系：MDA-MB-231和MDA-MB-468浓度：5、10和20μM孵育时间：0、6、12、24、36和48小时结果：以剂量和时间依赖性方式显著诱导LC3B-II,导致TNBC细胞中p62积聚,以剂量和和时间依赖的方式增加γH2AX,激活ATM、NBS1和SMC1的磷酸化,以剂量依赖性方式增加细胞核和细胞质中的p62,并显著减少DNA损伤诱导的H2A多泛素链的形成。降低细胞周期蛋白A、细胞周期蛋白B、CDK1和CDK2的细胞水平,增加P21和CHK1(丝氨酸345)和CHK2(苏氨酸68)的磷酸化水平,并以剂量依赖性方式增加细胞色素c、切割caspase-3、切割caspase-9和切割PAPR。细胞周期分析[1]细胞系：MDA-MB-231和MDA-MB-468浓度：5、10和20μM孵育时间：48小时结果：诱导细胞周期阻滞于S期。凋亡分析[1]细胞系：MDA-MB-231和MDA-MB-468浓度：5、10和20μM孵育时间：48小时结果：显著诱导TNBC细胞凋亡,并以剂量依赖性方式明显增加晚期凋亡的比例。
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